[发明专利]一种利用化学基团抑制神经干细胞分化的调控方法有效
申请号: | 200810239130.5 | 申请日: | 2008-12-09 |
公开(公告)号: | CN101429494A | 公开(公告)日: | 2009-05-13 |
发明(设计)人: | 崔菡;任永捐;胡堃 | 申请(专利权)人: | 北京奥精医药科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/06 | 分类号: | C12N5/06 |
代理公司: | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 | 代理人: | 胡敬红 |
地址: | 100085北京市海淀*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 化学 基团 抑制 神经 干细胞 分化 调控 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种可抑制神经干细胞分化的调控方法,且利用化学基团抑制其分化。
背景技术
神经干细胞能够分化为功能神经细胞,为神经组织工程提供了细胞来源,这为治疗中枢 神经系统疾病和损伤提供了希望。体外实验中,神经干/前体细胞能在丝裂原作用下增殖,也 能在微环境的影响下分化为神经元、星型胶质细胞和少突胶质细胞。
研究表明,神经干细胞的行为受到内部程序和外部信号的调控,其中外部信号来自培养 基、基底和细胞间的相互作用。例如,表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维生长因子(bFGF)能促 进中枢神经系统胚胎前体细胞的增殖,形成神经球。而且,神经生长因子、睫状神经营养因 子、胰岛素样生长因子-1和视黄酸也对神经干细胞的发育起着非常重要的调控作用。除了上 述的因子之外,来自细胞-细胞接触的信号也对神经干细胞的多潜能分化具有调控作用。若干 研究已经证实不同的聚合物基底能够调控神经干细胞的行为。尽管如此,聚合物表面在外界 环境作用下可能发生结构重组,从而表现出不同的表面粗糙度和形貌,这些变化可能干扰对 干细胞生物学行为与表面性质之间关系的研究,从而难以阐释这些基础相互作用之间的联系。 因此,不同基底对于神经干细胞在的调控行为尚待深入研究。
研究已经证明,化学基团能控制细胞的生长和分化,包括成骨细胞样细胞、人成纤维细 胞和间充质干细胞。表面化学能调控细胞-基质的黏附和FAK信号通道。因此,神经干细胞 对于不同基底的反应可能是源于这些基底的化学性质。而且,化学基团的组成是生物材料非 常重要的化学性质,包括膜和三维支架。
由于神经干细胞很容易发生分化,且其分化方向多样化,因此目前对神经干细胞的研究 多集中在其分化功能的调控方面,神经干细胞的体外分离培养是研究的重要方法,然而未分 化的神经干细胞具有低的免疫原性和增殖能力。因此,寻找一种能够抑制神经干细胞分化, 保持神经干细胞状态的化学基团,将有助于我们理解生物材料对于神经干细胞的调控作用, 并且将为设计生物材料来调控神经干细胞的提供了方法。
发明内容
本发明的目的意在提供一种抑制神经干细胞分化的调控方法,利用化学基团抑制神经干 细胞球中细胞向外迁移,较长时间保持神经干细胞球的形状,保持未分化的神经干细胞表型。
一种利用化学基团能够抑制神经干细胞分化的调控方法,其特征在于:在培养神经干细 胞时,使神经干细胞与羟基基团接触。
所述神经干细胞置于羟基化表面上。
所述表面的基底为无机物或有机物。
所述表面的基底为玻璃。
所述羟基化为化学修饰法或物理吸附方法。
所述神经干细胞的细胞形式为单细胞或神经干细胞球。
所述羟基基团添加在培养液内。
神经干细胞对于不同的化学基团能产生不同的反应,本发明人经过多次实验发现,在培 养神经干细胞的过程中,将神经干细胞与羟基基团接触,能抑制神经干细胞分化。
本发明人通过将神经干细胞接种在羟基化表面的玻璃片上,在培养液中培养,经过1天 和5天后,神经球并没有发生分化,说明羟基基团能抑制神经干细胞分化。
附图说明
图1神经球在羟基化表面培养1天的情况,a为光镜图片,b为荧光显微镜图片。
图2神经球在羟基化表面培养5天的情况,a为光镜图片,b为荧光显微镜图片。
图3神经球在氨基化表面培养1天的情况,a为光镜图片,b为荧光显微镜图片。
图4神经球在氨基化表面培养5天的情况,a为光镜图片,b为荧光显微镜图片。
图5神经球在羧基化表面培养1天的情况,a为光镜图片,b为荧光显微镜图片。
图6神经球在羟基化表面培养5天的情况,a为光镜图片,b为荧光显微镜图片。
具体实施方式
下面结合实施对本发明作进一步的详细说明。
实施例1
1、制备羟基修饰表面
将直径10mm的圆形玻璃片用作试验的基片,使用煮沸的0.01M SDS溶液和0.1N HCl 溶液依次清洗30分钟,然后用去离子水漂洗干净保存待用。
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