[发明专利]鸡禽流感疾病抗病育种的方法及专用试剂盒

权利要求书

1、一种培育鸡的方法，是检测待测鸡的序列表中序列1所示核苷酸序列的自5′末端第2216位脱氧核糖核苷酸是G还是A，确定待测鸡的基因型是AA、BB还是AB，采用AA基因型的鸡进行育种；所述AA基因型为序列表中序列1所示核苷酸序列的自5′末端第2216位脱氧核糖核苷酸为A的纯合体；所述BB基因型为序列表中序列1所示核苷酸序列的自5′末端第2216位脱氧核糖核苷酸为G的纯合体；所述AB基因型为它们的杂合体。

2、根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述检测待测鸡的序列表中序列1所示核苷酸序列的自5′末端第2216位脱氧核糖核苷酸是G还是A的方法如下：

以待测鸡的基因组DNA为模板，用如下两对引物中的任一对进行PCR扩增：

1)pCF和pAR；

2)pCF和pBR；

以所述pCF和pAR为引物的PCR扩增产物用Tsp509I酶切、以pCF和pAR为引物的PCR扩增产物用CviQI酶切，然后电泳检测酶切产物的片段的大小；所述pCF的核苷酸序列为序列表中的序列2；所述pCR的核苷酸序列为序列表中的序列3；所述pAR的核苷酸序列为序列表中的序列4。

3、根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述方法中，用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测酶切产物，以pCF和pAR为引物，只有两条带，待测鸡的基因型是AA；只有一条带，待测鸡的基因型是AB；只有三条带，待测鸡的基因型是BB；

以pCF和pBR为引物，只有两条带，待测鸡的基因型是BB；只有一条带，待测鸡的基因型是AA；只有三条带，待测鸡的基因型是AB。

4、根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述方法中，用3g/100ml的琼脂糖凝胶电泳检测酶切产物，以pCF和pAR为引物，只有50-100bp的一条带，待测鸡的基因型是AA；只有100bp的一条带，待测鸡的基因型是BB；有两条带，待测鸡的基因型是AB；

以pCF和pBR为引物，只有50-100bp的一条带，待测鸡的基因型是BB；只有100bp的一条带，待测鸡的基因型是AA；有两条带，待测鸡的基因型是AB。

5、辅助检测鸡禽流感抗性的试剂盒，包括引物pCF、引物pAR和限制性内切酶Tsp509I，所述引物pCF的核苷酸序列为序列表中的序列2，所述引物pAR的核苷酸序列为序列表中的序列3。

6、根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括进行PCR的试剂和进行电泳的试剂。

7、辅助检测鸡禽流感抗性的试剂盒，包括引物pCF、引物pBR和限制性内切酶CviQI，所述引物pCF的核苷酸序列为序列表中的序列2，所述引物pBR的核苷酸序列为序列表中的序列4。

8、根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括进行PCR的试剂和进行电泳的试剂。

9、权利要求5至8中任一所述试剂盒在鸡的育种中的应用。