[发明专利]水稻品种抗褐飞虱主基因Bph3的分子标记方法

说明书

一、技术领域

本发明提供了水稻品种抗褐飞虱主基因Bph3的分子标记方法，属于分子遗传学领域，专用于水稻抗褐飞虱品种的选育与种质资源的利用。

二、背景技术

水稻是我国的重要粮食作物。褐飞虱是一种水稻单食性害虫，属同翅目飞虱科。通过口针吸食水稻茎秆韧皮部汁液，为典型的刺吸式害虫。严重时引起稻株下部变黑、腐烂发臭、倒瘫，称之为“虱烧”，导致水稻减产或失收。目前，对褐飞虱的防治主要依赖于化学农药，但此措施不但增加了生产成本，且污染环境，因此，最为经济有效而不造成污染的防治措施是抗虫品种的应用。

迄今，已发现和鉴定了13个抗褐飞虱主基因。其中，显性基因6个，即Bph-1(Athwal et al.，1971)、Bph-3(Lakshiminarayana and Khush，1977)、Bph-6(Kabir and Khush，1988)、Bph-9(Ikeda et al.，1985；Nemoto et al.，1989a)、Bph-10(t)(Multani et al.，1994；Ishii et al.，1994)和Bph-13(t)(刘国庆等，2001)。隐性基因7个，即bph-2(Athwal et al.，1971)、bph-4(Lakshiminarayana and Khush，1977)、bph-5(Khush et al.，1985)和bph-7(Kabir and Khush，1988)、bph-8(Ikeda，1985；Nemoto et al.，1989a)、bph-11(t)和bph-12(t)(Hirabayashi and Ogawa，1999)。其他研究还进行了抗褐飞虱的QTL(quantitive trait locus，数量性状位点)定位研究，已鉴定了26个抗褐飞虱QTL。但真正用于水稻抗虫育种的抗褐飞虱基因并不多。

国际水稻研究所自1973年先后选育了一系列分别携带Bph-1、bph-2和Bph-3等抗褐飞虱主基因的水稻品种，在种植这些品种的地区有效地控制了褐飞虱的暴发。然而，由于褐飞虱新生物型的产生，抗褐飞虱品种逐渐丧失抗性或面临抗性丧失的危险(Pathak and Khush，1979；Pathak and Saxena，1980；Heinrichs，1986；Saxena and Khan，1989；Heinrichs，1994；Gallagher et al.，1994)。我国也先后育成一系列含有抗褐飞虱基因Bph-1的品种(组合)，对褐飞虱的防治起了积极的作用。吕仲贤等(2002)对1986～2000年国家和浙江省育种攻关协作组提供的3328份水稻新品种(系)进行了抗褐飞虱鉴定和筛选，结果发现从“七五”、“八五”到“九五”抗虫品种鉴出率呈下降趋势，水稻抗褐飞虱育种未受到足够重视。目前，国内褐飞虱以生物型2为主，致害力强的孟加拉型生物型比例上升，原来带有Bph-1的抗虫品种，已逐渐失去抗性，因而迫切需要培育新的携带多个抗性基因的抗虫品种。

由于抗虫性鉴定的复杂性，利用常规育种手段往往难以有效地聚合不同的抗虫基因。而在找到与抗虫基因紧密连锁或共分离的分子标记的基础上，借助分子标记辅助选择(Marker-assisted selection，MAS)技术则可以有目的地进行抗虫基因或QTL的聚合，选育持久抗性品种，延缓抗虫品种的退化年限和防止褐飞虱新生物型的发生。

三、发明内容

技术问题

本发明的目的是：提供了水稻品种Rathu Heenati抗褐飞虱主基因Bph3的分子标记方法，通过检测与这些抗褐飞虱主基因连锁的分子标记，可以预测水稻植株的褐飞虱抗性，加快抗褐飞虱水稻的选择进度。

技术方案

水稻品种抗褐飞虱主基因Bph3的分子标记方法，水稻品种Rathu Heenati对褐飞虱的抗性由一个主基因Bph3控制，其特征在于：

用标记引物A4，

左端序列AAGCAGCATAAACTGATTGA

右端序列TCATCTTCTGAAAAAGCAAT

或者用标记引物RM16533，

左端序列TTTGCTTAGTCGGCAGATGTCC

右端序列CATAAGAACGTACCTCCACTGATTCC

或者用标记引物RH7841，

左端序列TGCCAAGTATGTATGCCTAT

右端序列TTTTAGAGACCGTGTCCTTG

或者用标记引物RH786，

左端序列TTTGAAGTTCTTTCCATCTGA