[发明专利]细胞培养繁殖树莓的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种灌木类经济植物的组织培养，特别是涉及一种细胞培养繁殖树莓的方法，属于生物工程和灌木类经济植物的快速繁育技术。

背景技术

树莓是一种蔷薇科悬钩子属多年生落叶小灌木，果实富含氨基丁酸、维生素、水杨酸、抗氧化物歧化酶鞣酸等防病抗癌药素，具有降血脂、解热镇痛、养筋活血等功效，具有很高的经济价值。目前，我国已有树莓栽培面积约3000hm²，据预测，我国树莓的发展空间约为50000hm²。由于现有繁育苗木方式落后，苗木供不应求已经成为目前发展树莓生产的主要限制因素。我国生态环境问题日益突出，荒漠化面积很大(如科尔沁沙地等)。树莓对干旱和贫瘠的耐受性强，适应性广。在科尔沁沙地大力发展树莓不但对我国生态保护和恢复具有着重要意义，还能扩大当地的就业，促进人们增收致富。扩繁推广树莓既具有较高的经济效益，又有重大的社会和生态效益。

发明内容

本发明的目的就在于克服现有技术存在的上述不足，给出一种细胞培养繁殖树莓的方法，这种细胞培养繁殖树莓的方法针对树莓繁育苗木方式落后、苗木供不应求这一现实状况，采用组培技术建设大规模树莓苗木基地快速繁育树莓，加快我国的荒漠化治理与生态恢复，促进地区经济建设发展。

本发明给出的技术解决方案是：这种细胞培养繁殖树莓的方法，其特点是

选用树莓幼嫩茎段、茎尖作外植体(以春季为佳)，剪去叶片冲洗，然后在无菌室用酒精消毒，再用氯化汞溶液浸泡，用无菌水冲洗，剪成带腋芽茎段，接种到灭过菌的诱导培养基上，然后在26±1℃，光照强度1900lx，光照时间12h/d条件下培养，8～12天后即可长出侧芽，当侧芽长至2～3cm时，可进行继代培养。

将侧芽切成小块，接种在试管中的培养基上，在温度26±1℃下培养，光照强度2000lx，光照时间12h/d。22～28天后长出4～7片嫩叶；

将经过几次继代培养之后的芽苗从试管中取出，接种在培养瓶中的培养基上进行生根培养(继代次数越多越易生根)，生根培养温度为26±1℃，暗培养+光照培养，光照时间14h/d，光照强度1800lx，15～20天后，芽体基部就长出4～6条不定根，敞开培养瓶，在培养室内锻炼4～6天后，即可移栽到苗床上；

在网室(或大棚)中准备铺好基质的苗床。将试管苗从培养瓶中取出，放在温水(18～22℃)中，将附着在根上的培养基清洗掉(不得伤苗)，再用温水清洗，将培养基彻底洗掉，最后将试管苗蘸IBA溶液后移栽入苗床；

移栽初期，适当遮荫保湿(湿度在85～95％)；在苗床上培养22～28天后即可转入营养钵内，28～32天后，即可移入大田。

注：在移栽入苗床前的所有接种操作均在超净工作台上完成。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：树莓生长期短，经济效益高；易于管理，病害较少；栽培当年即可坐果，第二年即有经济产量，3～4年就进入盛果期，经济寿命可达15～25年，亩产可达1000kg，最低市价5元/kg，即直接经济效益5000元/亩/年。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的具体技术方案做进一步说明：

选用树莓幼嫩茎段、茎尖作外植体(以春季为佳)，剪去叶片，放入洗衣粉水(浓度约5％)浸泡5min后，在自来水下冲洗30～60min(水流不宜过大)，然后在无菌室先用70～75％酒精消毒10s，再用0.1％的氯化汞溶液浸泡7～10min，用无菌水冲洗4～5次，剪成0.5～1.5cm的带腋芽茎段，接种到灭过菌的诱导培养基(MS_改良+6-BA 2mg/L+NAA 0.45mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L)上，然后在26±1℃，光照强度1900lx，光照时间12h/d条件下培养。约10天后即可长出侧芽，当侧芽长至2～3cm时，可进行继代培养。

将侧芽切成约1mm的小块，接种在试管中的培养基(2MS_改良+6-BA 2mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖40g/L+琼脂7g/L)上，在温度26±1℃下培养，光照强度2000lx，光照时间12h/d。约25天后，可长出4～7片嫩叶。