[实用新型]人类免疫缺陷病毒抗体免疫磁珠快速检测试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型是涉及生物应用技术领域，本实用新型涉及HIV抗体诊断试剂，特别是涉及一种以纳米免疫磁珠技术检测抗体的免疫层析快速诊断试剂。

背景技术

获得性免疫缺陷综合症(Acquired Immunodeficiency syndrome，AIDS)简称艾滋病，是由人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiencyvirus，HIV)感染引起的一种严重传染病。自美国1981年诊断出首例艾滋病患者以来，据最新的WHO数据评估，至2007年底，全球估计共有3300万艾滋病病毒感染者，中国国内有艾滋病病毒感染者约70万。

艾滋病病毒的传播途径主要包括血液传播、性接触、毒品注射和母婴传播。在人体内的潜伏期平均为7～10年。HIV感染潜伏期病人没有明显的临床症状，但具有高度的传染性。对HIV进行检测以发现传染源和切断传播途经是防制AIDS最有效的手段。HIV免疫学检测是最有效和最广泛使用的方法，HIV抗体筛查是我国法定的的四个血源性筛查项目之一。

HIV抗体检测最常用的试剂为HIV抗体酶联免疫试剂(ELISA)和胶体金类试剂，采用双抗原夹心法的第三代HIV抗体诊断试剂盒，灵敏度达到99％以上，特异性大于97％，目前得到广泛使用。两类试剂的基本特点如下：ELISA试剂需要专用的实验室和专业人员进行检验，操作复杂，但灵敏度更高；胶体金类试剂操作简便、快速、适于现场检测，但灵敏度稍低，结果用肉眼直接观察，会产生误差，亦不能记录。

纳米免疫磁珠是含有铁元素的超顺磁纳米颗粒，外面包覆着聚乙烯类高分子物质，并可带有羧基或氨基，用于和蛋白质分子交联。免疫磁珠在细胞和大分子分离、纯化及诊断上都已得到应用。但在免疫层析诊断试剂上还鲜有运用。美国Quantum Design公司最新推出了测定层析试纸上微量磁性物质的检测仪(MICT)，能定量检测到微量(pg级)的磁性物质，为纳米免疫磁珠检测试剂的研制提供了可能。

纳米免疫磁珠检测试剂基本原理如下：利用免疫磁珠标记一种抗原或抗体，在试剂的NC膜上包被相应的配对抗原或抗体，检测时当样品中含相应的特异性抗体或抗原时，标记磁珠颗粒和样品中配体相结合形成复合物，然后在NC膜上层析，再被包被抗原或抗体捕获，聚集在检测线

纳米免疫磁珠检测试剂基本原理如下：利用免疫磁珠标记一种抗原或抗体，在试剂的NC膜上包被相应的配对抗原或抗体，检测时当样品中含相应的特异性抗体或抗原时，标记磁珠颗粒和样品中配体相结合形成复合物，然后在NC膜上层析，再被包被抗原或抗体捕获，聚集在检测线上，通过MICT测定检测线上捕获磁珠的含量实现结果的判定。和胶体金试类剂相比，免疫磁珠检测试剂最大的不同在于将标记胶体金改为标记磁珠，检测结果时用MICT对检测线上的磁珠含量进行检测，而不是依靠肉眼去总判定，使结果判定更为精确、灵敏、客观和便于记录保存。利用纳米免疫磁珠研制HIV抗体检测快速诊断试剂尚无报道。

发明内容

本实用新型是提供一种灵敏度高、特异性强、检测快速、操作简便、适合现场检测和实时记录保存结果的HIV抗体纳米免疫磁珠快速检测试剂盒技术方案如下：

一种人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体免疫磁珠快速检测试剂盒10，其特征是试纸条(9)由在塑料支撑板(8)一端搭接上样垫(1)，上样垫(1)的一端搭接含有标记HIV抗原gp41、gp36的纳米免疫磁珠垫(2)，在磁珠垫(2)的一端搭接硝酸纤维素NC膜(3)，NC膜(3)包被有相互分离的gp41检测线(T1)检测线(T1)(5)gp36检测线(T2)(6)和质控线(C)(7)，NC膜(3)另一端搭接吸样垫(4)组成，将试纸条(9)装入塑料试剂盒10中构成。

所述的人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体免疫磁珠快速检测试剂盒，其特征在于所述的标记和包被用抗原为重组表达HIV抗原gp41、gp36，亦可再增加或替换为HIV其它特异性抗原gp160、gp120、P24及0亚型gp41。

所述的人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体免疫磁珠快速检测试剂盒，其特征在于纳米免疫磁珠为含铁的超顺磁乳胶颗粒，直径为200±50nm，表面富含羧基；塑料支撑板厚度小于0.3mm；NC膜的宽度为35mm；上样垫为玻璃纤维膜或无纺布，吸样垫由吸水滤纸构成。