[实用新型]肺癌遗传检测试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型属生物技术领域，具体涉及一种肺癌遗传风险基因位点检测试剂盒，是通过利用荧光定量PCR，检测基因组DNA样本中的六个肺癌遗传风险基因SNP位点基因型的试剂盒。

背景技术

肺癌是最常见的肺原发性恶性肿瘤，由于绝大多数肺癌起源于支气管粘膜上皮，也称支气管肺癌。肺癌发病早期症状缺乏特征性且较复杂，只有少部分患者会有症状。这与肿瘤生长的位置有关，如果长在支气管内，会阻塞气体的出入，并刺激支气管壁，而造成咳嗽，有时会咳出带血丝的痰。如果长在肺的其它部位，只有靠X线检查才能发现。因为肺部是人体进行气体交换的重要部位，血流充足，血液循环快，淋巴腺多，所以肺癌特别容易转移，当发现时往往病情难以控制。如果病人出现胸痛、胸闷或关节痛等症状时，说明已经进入肺癌中晚期，甚至癌细胞已出现转移。

肺癌的形成与遗传、环境、行为生活方式因素的共同作用密不可分。虽然遗传因素不可改变，但及早检测出是否存在患肺癌的遗传风险，可以在未发生症状之前通过定期的身体检查尽早发现和尽早治疗；还可以通过控制饮食、改善生活习惯等干预手段，弥补遗传风险。这对于肺癌的防治具有十分重大的意义。

研究表明，肺癌的发病与细胞色素P4501A1基因(CYP1A1)上的Ile462Val位点、Msp I位点、细胞色素P4502D6基因(CYP2D6)上的C188T位点、X射线交错互补修复基因1(XRCC1)上的Arg399Gln位点、基质金属蛋白酶1基因(MMP1)上的1G/2G位点、5，10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)上的C677T位点这六个SNP位点基因型有很密切的关系。

大量研究显示，CYP1A1基因与环境因素的交互作用会影响各种癌症的发病风险。CYP1A1作为重要解毒酶在肺组织中有大量表达，由于吸烟等外界环境因素刺激下表达量增大，而烟草中所含的多环芳烃类物质经CYP1A1代谢成各种高活性的致癌物质，若下游的II相代谢酶的活性不足，会使得致癌物质在肺中蓄积，易导致肺癌的发生。因此，CYP1A1基因多态性导致的酶活性异常增强会显著提高前致癌物的激活效率，是肺癌发病的重要风险因素。Ile462Val是位于该基因第7号外显子处的A/G多态位点，引起第462号密码子编码的Ile变为Val，由于该多态位点位于CYP1A1的血红素结合区，因此影响了血红素与编码蛋白的结合，具有提高酶活性的作用。该多态位点有三种基因型：Ile/Il e、Ile/Val和Val/Val，当个体携带Ile/Val和Val/Val基因型时，CYP1A1的酶活性显著增强，对多环芳烃类物质的激活作用增强，因此转化生成的高活性致癌物质增多，提高了肺组织细胞癌变风险，引起肺癌的发病风险升高。Msp I酶切多态是CYP1A1另一个最常见的多态位点之一，位于3’端非编码区多聚腺嘌呤下游264bp处，为T/C置换(T3801C)。该多态常见的等位基因为m1、m2，m2(C等位基因)可被限制性核酸内切酶Msp I识别，而m1(T等位基因)则不能识别。三种基因型为m1/m1(TT)、m1/m2(TC)、m2/m2(CC)，当个体携带m2/m2基因型时，CYP1A1的诱导活性增强，即容易受到环境致癌物的影响，从而诱导产生更多的CYP1A1，引起致癌物质的活化加速，若其它解毒酶不能及时将该类物质代谢排出，则会造成DNA损伤和细胞畸变，增加患癌症的风险。

，CYP2D6基因上存在着多个多态位点，多态位点的分布具有种群特异性。通常，根据CYP2D6代谢能力不同，可分为四个亚型，分别为超强代谢型(UM)、强代谢型(EM)、中间代谢型(HEM)和弱代谢型(PM)，其中弱代谢型在欧美白种人中较为常见，而强代谢型则在亚洲人中较为常见。CYP2D6酶活性增强使机体对环境致癌物敏感度增强，与肺癌的易感性上升有关。C188T位点为CYP2D6基因第1号外显子处的一个C/T多态，该多态造成表达的蛋白第34位的脯氨酸变成丝氨酸(Pro34Ser)，导致生成酶的活性下降。该位点有三种基因型，分别为CC、CT、TT，当个体携带CT和CC基因型时，相对TT基因型，CYP2D6的酶活性增强，对香烟中的前致癌物的激活作用增强，因此转化生成的高活性致癌物质增多，提高了肺组织细胞癌变风险，引起肺癌发病风险的升高。