[发明专利]HGF制剂

说明书

技术领域

本发明涉及含有HGF(Hepatic Growth Factor、肝细胞生长因子)的制剂。

背景技术

HGF为由中村等人发现的、对成熟肝细胞具有最强的生长促进活性的生理活性肽(例如，参照非专利文献1)，近年来可以通过生物工程技术实现量产(例如，参照非专利文献2)。对该HGF期待不仅作为对于肝炎、肝硬化的治疗或预防药，还期待对于肾炎、癌症等的治疗或预防药，此外还期待适用于抗癌剂的副作用抑制剂、创伤愈合剂等。

作为HGF的制剂，专利文献1中公开了在HGF中作为稳定剂含有白蛋白、人血清、明胶、山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇等的水溶液制剂。但是，上述HGF水溶液制剂在保存中存在HGF凝聚、混浊、进行凝胶化的缺点，此外还存在形成聚合物等物理化学稳定性低、生物活性降低的问题。

为了解决该问题，专利文献2中公开了在HGF中作为稳定剂含有精氨酸、赖氨酸、组氨酸、谷氨酰胺、脯氨酸、谷氨酸、天冬氨酸等的冷冻干燥制剂。此外，专利文献3中公开了在HGF中作为稳定剂含有甘氨酸、丙氨酸、山梨糖醇、甘露糖醇、硫酸葡聚糖等的冷冻干燥制剂。

上述冷冻干燥制剂可以在一定程度上达到HGF的稳定化，但是期待稳定化效果更好的HGF制剂。

专利文献1：国际公开WO90/10651号小册子

专利文献2：国际公开WO00/72873号小册子

专利文献3：日本特开平9-25241号公报

非专利文献1：Biochem.Biophys.Res.Commun.，122，1450，1984

非专利文献2：Nature，342，440，1989

发明内容

本发明的目的在于，提供与现有的HGF制剂相比，即使长期保存也更稳定的HGF制剂。

本发明人为了解决上述课题进行了深入研究结果发现，通过向HGF中添加蔗糖，阻碍HGF的聚合物生成，得到稳定的HGF制剂，基于此发现进一步进行研究，至此完成了本发明。

即，本发明涉及，

[1]HGF制剂，含有HGF和蔗糖，

[2]根据上述[1]中所述的HGF制剂，其中，相对于1重量份的HGF，蔗糖的含量为0.01～9重量份，

[3]根据上述[1]或[2]中所述的HGF制剂，其中，进一步含有中性氨基酸，

[4]根据上述[3]中所述的HGF制剂，其中，中性氨基酸为丙氨酸，

[5]根据上述[1]～[4]中的任意一项所述的HGF制剂，其中，进一步含有缓冲剂，

[6]根据上述[5]中所述的HGF制剂，其中，缓冲剂为柠檬酸盐，

[7]根据上述[1]～[6]中的任意一项所述的HGF制剂，其中，进一步含有氯化钠，

[8]根据上述[1]或[2]中所述的HGF制剂，其中，除了HGF和蔗糖之外，进一步含有中性氨基酸、氯化钠、缓冲剂和表面活性剂，

[9]根据上述[8]中所述的HGF制剂，其中，中性氨基酸为丙氨酸，缓冲剂为柠檬酸盐，表面活性剂为聚山梨醇酯，

[10]根据上述[1]～[9]中的任意一项所述的HGF制剂，其为冷冻干燥制剂，

[11]HGF的稳定化方法，其特征在于，向HGF中添加蔗糖抑制HGF聚合物生成，以及

[12]根据上述[11]中所述的稳定化方法，其中，相对于1重量份的HGF，蔗糖的添加量为0.01～9重量份。

本发明的HGF制剂具有即使长期保存，也比现有的HGF制剂更稳定的效果。

具体实施方式

本发明为含有HGF和蔗糖而成的HGF制剂。

本发明的有效成分HGF若为被纯化成可以作为药物使用的程度，则可以使用通过各种方法制备的HGF。此外，本发明中使用的HGF还可以为5个氨基酸残基缺失的缺失型(dLeHGF)。

作为HGF的制备方法，已知有各种方法，例如，可以从大鼠、牛、马、绵羊等哺乳动物的肝脏、脾脏、肺脏、骨髓、脑、肾脏、胎盘等脏器，血小板、白血球等血细胞，或血浆、血清等中抽提、纯化来得到。此外，也可以对产生HGF的原代培养细胞、株化细胞进行培养，从培养物(培养上清、培养细胞等)分离纯化，得到HGF。或者，通过基因工程方法，将编码HGF的基因整合到适当的载体中，将其插入到适当的宿主中进行转化，可以从该转化体的培养物得到目标重组HGF(例如，参照Nature，342，440，1989等)。对于上述宿主细胞不特别限定，可以使用一直以来在基因工程方法中使用的各种宿主细胞，例如大肠杆菌、枯草杆菌、酵母、丝状菌、植物或动物细胞等。