[发明专利]吩噻嗪衍生物色素的检测方法及用于该方法的显色剂试剂有效

专利信息
申请号: 200880003539.5 申请日: 2008-01-30
公开(公告)号: CN101595386A 公开(公告)日: 2009-12-02
发明(设计)人: 米原聪;稻村范郎 申请(专利权)人: 爱科来株式会社
主分类号: G01N31/00 分类号: G01N31/00;G01N21/78;G01N31/22
代理公司: 北京林达刘知识产权代理事务所 代理人: 刘新宇;李茂家
地址: 日本*** 国省代码: 日本;JP
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摘要:
搜索关键词: 吩噻嗪 衍生物 色素 检测 方法 用于 显色 试剂
【说明书】:

技术领域

本发明涉及吩噻嗪衍生物色素的检测方法、利用吩噻嗪衍 生物色素的检测来进行的目的成分的测定方法及用于上述方法 的显色剂试剂。

背景技术

作为目的成分的测定(定性、定量)方法,在实践中广泛 采用利用氧化还原反应的酶法。该方法为例如由欲测定的目的 成分生成氧化物质,用氧化酶催化该氧化物质与通过氧化生成 显色化合物的显色剂反应,测定生成的显色的吸光度的方法。 该方法中,吸光度的大小对应于生成的显色化合物的量,生成 的显色化合物的量对应于生成的氧化物质的量,氧化物质的量 对应于目的成分的量。即,通过生成的显色(生成的显色化合 物)的检测,以如上所述的氧化还原反应为媒介,可间接地测 定目的成分。

上述酶法中使用的显色剂有例如特林德(Trinder)试剂及 N-(羧甲基氨基羰基)-4,4’-双(二甲氨基)二苯胺钠盐(商品 名DA-64;和光纯药公司生产)。此外,生成显色化合物亚甲蓝 等的吩噻嗪衍生物色素的显色剂已知例如10-(羧甲基氨基羰 基)-3,7-双(二甲氨基)吩噻嗪盐(商品名DA-67;和光纯药 公司生产,以下也称“DA-67”)、10-(乙酰氨基羰基)-3,7-双(二 甲氨基)吩噻嗪、专利文献3记载的10-(苯羰基)-3,7-双(二 甲氨基)吩噻嗪、专利文献4记载的10-(3-(甲基羧基氨基)- 六甲基-氨基)-吩噻嗪、10-(3-(甲基羧基氨基)-4-甲基-苯基 -氨基)-吩噻嗪、10-((3-(甲基羧基氨基甲基)-苯基)-甲氨 基)-吩噻嗪、10-(1-萘基氨基)-吩噻嗪、10-(甲基)-吩噻 嗪、10-(苯基氨基)-吩噻嗪、10-(甲氨基)-吩噻嗪等。吩噻 嗪衍生物色素在相对长波长处如590~670nm处有极大吸收,因 此其中生成亚甲蓝等吩噻嗪衍生物色素的显色剂如DA-67等由 于以下原因而受到重视。

即,如体液那样的样品中,除含有目的成分外,还含有各 种成分,其中也存在于500nm附近及其以下的波长区域有吸收 的成分。因此,如上所述的酶法中,为避免目的成分以外的成 分产生的影响,期望由氧化还原反应生成的显色化合物尽量可 在长波长处检测。因此,如上所述生成在590~670nm处有极大 吸收的吩噻嗪衍生物色素的DA-67等显色剂,被认为特别有用。

然而,例如全血样品及血细胞样品那样的含有血红蛋白(以 下称“Hb”)的样品在约570~630nm处显示影响色素检测的程度 的吸收,另外,由于Hb的氧化(met化)而有可能在约570~670nm 处显示影响吩噻嗪衍生物色素检测的程度的吸收。从而,即便 是生成吩噻嗪衍生物色素的如上所述的显色剂,应用于此类样 品时也会担心其对测定的影响。

另外,临床化学专用的自动分析装置检测波长被固定,例 如有分析装置在610~660nm处无检测波长,在700nm处有检测 波长。然而,610~670nm处有极大吸收的吩噻嗪衍生物色素因 在700nm下的检测极为困难,因此无法用这种在700nm处有检测 波长的现有的装置测定。

此外,例如呈蓝色的亚甲蓝通过还原可成为无色的无色亚 甲蓝。利用这种性质,将亚甲蓝等吩噻嗪衍生物色素自身作为 显色剂使用,由目的成分生成还原物质还原吩噻嗪衍生物色素, 通过测定还原导致的蓝色的消失(吩噻嗪衍生物色素的减少) 也可测定目的成分(专利文献1及专利文献2)。然而,即便在该 情况下也会产生与上述同样的问题。

专利文献1:日本特开2000-214152号公报

专利文献2:日本特开2000-214155号公报

专利文献3:日本特公平4-27839号公报

专利文献4:日本特公昭60-33479号公报

发明内容

因此,本发明的目的在于提供一种吩噻嗪衍生物色素检测 方法,其即便在比显示极大吸收的波长更长波长处也可检测吩 噻嗪衍生物色素。

本发明的吩噻嗪衍生物色素的检测方法的特征在于,其为 一种通过吸光度测定来检测反应体系中的吩噻嗪衍生物色素的 方法,所述方法包括吩噻嗪衍生物色素的检测工序,上述检测 工序中,在选自下述式(I)表示的化合物、下述式(II)表示 的化合物及类黄酮系色素所组成的组中的至少一种色素物质的 存在下,进行吩噻嗪衍生物色素的检测。

R1-N=N-R2      ...(I)

上述式(I)中,

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