[发明专利]用于检测和/或鉴别细菌的介质

说明书

本发明领域涉及微生物生物化学分析领域，特别涉及细菌的检测与鉴 别。

病原性细菌、特别是革兰氏阴性菌如肠杆菌(entérobactéries)、弧菌 (Vibrionaceae)或者假单胞菌(Pseudomonas)与每年的许多疾病、流行病等相 关。

假单胞菌是遍在细菌，存在于土壤中、植物上，特别是在淡水和海水 中。许多菌株可以在低温下生长，因此污染冰箱中贮存的食物，并且与胃 肠道感染相关。它们也与医院内感染相关。

通常在临床细菌学中分离的肠杆菌属于柠檬酸杆菌属(Citrobacter)、肠 杆菌属(Enterobacter)、埃希氏菌属(Escherichia)、哈夫尼菌属(Hafnia)、克雷 伯氏菌属(Klebsiella)、摩根氏菌属(Morganella)、变形杆菌属(Proteus)、普罗 威登斯菌属(Providencia)、沙门氏菌属(Salmonella)、沙雷氏菌属(Serratia)、 志贺氏菌属(Shigella)和耶尔森氏菌属(Yersinia)。

大肠杆菌(E.coli)是主要存在于消化道中的需氧菌。然而，水中存在 该细菌表示粪便污染，而且某些菌株是病原性的并导致腹膜、胆、阑尾或 者生殖器化脓。

沙门氏菌属细菌是脊椎动物和鸟类的肠道寄生物并且通过污染的食物 传播至人。然后导致胃肠炎和伤寒以及副伤寒。

最后柠檬酸杆菌如弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)是人和动物消 化道的共生菌，其可以分离自尿液、呼吸道分泌物或者甚至从血液中分离， 并且与免疫抑制个体中的感染相关。

对于这些革兰氏阴性菌的早期和特异性检测使得可以提供在治疗方面 消除污染的合适溶液等。

现有许多检测革兰氏阴性菌的介质。这种检测可特别基于使用对希望 检测的细菌的代谢活性如酶活性是特异的特定底物：通过选择底物，根据 是否有反应而可以鉴定微生物的性质。

可特别提及的是UriSelect 4介质(Bio-Rad)，其使用β-半乳糖苷酶底物 组合β-葡糖苷酶底物并且组合检测色氨酸酶以检测大肠杆菌菌株以及分离 β-半乳糖苷酶阳性/β-葡糖苷酶阴性柠檬酸杆菌属菌株。

也可提及的是UTI介质(oxoid)，其使用β-半乳糖苷酶底物组合β-葡糖苷 酶底物并且组合检测色氨酸酶以检测大肠杆菌菌株以及分离β-半乳糖苷酶 阳性/β-葡糖苷酶阴性柠檬酸杆菌属菌株。

CPS ID 3介质(bioMérieux)使用β-葡糖醛酸糖苷酶底物组合β-葡糖苷酶 底物，任选组合检测色氨酸酶以检测大肠杆菌菌株。

BBL CHROMagar Orientation介质(Becton-Dickinson)使用β-半乳糖苷酶 底物组合β-葡糖苷酶底物并且组合检测色氨酸酶以检测大肠杆菌菌株以及 分离β-半乳糖苷酶阳性/β-葡糖苷酶阴性柠檬酸杆菌属菌株。

最后，Urine Specific Agar介质(AES Laboratoire)使用β-葡糖醛酸糖苷酶 底物组合检测色氨酸酶以检测大肠杆菌菌株，并将其与柠檬酸杆菌属菌株 区分。

然而，使用β-葡糖醛酸糖苷酶底物检测大肠杆菌的显色介质呈现极佳的 特异性，但是由于不表达这种活性的少部分(5-10％)大肠杆菌菌株的存在而 导致灵敏性不佳。此外，一些柠檬酸杆菌属菌株也可产生β-葡糖醛酸糖苷酶 阳性菌落，具有与大肠杆菌相同的颜色。

对于使用β-半乳糖苷酶底物检测大肠杆菌的显色介质，需要通过进行区 分大肠杆菌与其它表达β-半乳糖苷酶活性、但不表达或者微弱表达β-葡糖苷 酶活性的肠杆菌特别是某些柠檬酸杆菌属菌株的额外检测证实鉴定结果。

关于沙门氏菌属的检测，可以提及的是SM ID介质，其使用葡糖醛酸 和β-半乳糖苷酶底物。然而，需要进行生物化学和/或血清学证实以检测沙 门氏菌属菌株并将其与其它肠杆菌特别是柠檬酸杆菌属菌株加以区分。

最后，关于假单胞菌属，可以提及的是Cetrimide介质，其使用Cetrimide 并且通过检测绿脓菌素以检测铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)菌 株，并将其与其它革兰氏阴性菌区分。然而，这种介质特异性方面的改良 将会具有优势。

本发明计划通过提供新的介质解决现有技术中存在的问题，所述新的 介质特别适于快速且廉价以及以易于执行的方式鉴别革兰氏阴性菌。