[发明专利]酮还原酶及其用途

权利要求书

1.一种重组酮还原酶多肽，其能够以SEQ ID NO：2的多肽活性的至少 1.5倍将化合物1-[4-(4-氟2-甲基-1H-吲哚-5-基氧基)-5-甲基-吡咯并 [2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基氧基]-丙-2-酮转化为1-[4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5- 基氧基)-5-甲基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基氧基]-丙-2-醇，所述多肽的氨 基酸序列如SEQ ID NO：6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、 28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、 60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、 92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、120、122、 124、126、128、130、132、134或136所示。

2.如权利要求1所述的重组酮还原酶多肽，其中所述重组酮还原酶多 肽是分离的多肽。

3.一种多核苷酸，其编码如权利要求1所述的重组酮还原酶多肽。

4.如权利要求3所述的多核苷酸，其选自由SEQ ID NO：5、7、9、 11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、 43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、 75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、 107、109、111、113、119、121、123、125、127、129、131、133和135 组成的组。

5.一种表达载体，其包括可操作地连接于适于指导在宿主细胞中表达 的控制序列的如权利要求3和4中任一项所述的多核苷酸。

6.如权利要求5所述的表达载体，其中所述控制序列是启动子。

7.如权利要求6所述的表达载体，其中所述启动子包括大肠杆菌启动 子。

8.如权利要求6所述的表达载体，其中所述控制序列是分泌信号。

9.一种宿主细胞，其包括如权利要求5至8中任一项所述的表达载体。

10.如权利要求9所述的宿主细胞，其与衍生工程酮还原酶的野生型 酮还原酶的细胞类型是同源的。

11.如权利要求9所述的宿主细胞，其与衍生工程酮还原酶的野生型 酮还原酶的细胞类型是异源的。

12.如权利要求9所述的宿主细胞，其中所述细胞是大肠杆菌。

13.如权利要求9或12所述的宿主细胞，其中构成所述表达载体的密 码子已经为在所述宿主细胞中表达而进行了优化。