[发明专利]4-羟基异亮氨酸的纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及4-羟基异亮氨酸的分离纯化方法，更详细而言，涉及利用了向缩醛胺体转化的(2S，3R，4S)-4-羟基异亮氨酸的分离纯化方法和分离除去方法。

背景技术

已知4-羟基异亮氨酸是非蛋白质性氨基酸的一种，从Fenugreek(胡芦巴)(Trigonella foenum-graecum L.)种子等中提取(非专利文献1、2、3)。

关于该4-羟基异亮氨酸，报道了血糖值依赖性的胰岛素分泌促进活性(专利文献1、非专利文献4)、胰岛素敏感性的增强作用(专利文献2、3、非专利文献5)、肌肉中的糖原生成促进活性(专利文献4、非专利文献6)、皮肤或头皮的保护作用(专利文献5)、脂肪吸收抑制作用(专利文献6)、抗肥胖作用(专利文献7)等，作为利用上述作用的医药品、健康食品原料、化妆品(香粧品)原料等有用。进而作为各种医药品的合成中间体也有用。

现在，作为得到4-羟基异亮氨酸的方法，已知从Fenugreek种子中提取(专利文献8、9、非专利文献1、2、3)和化学合成(专利文献10、11、非专利文献7)。

在提取法中，为了与皂甙类或其他氨基酸分离，需要用硅胶或离子交换树脂进行色谱操作或重结晶等繁琐的操作。特别是Fenugreek种子所含的4-羟基异亮氨酸，除含有基于发挥上述作用的观点被认为较重要的立体异构体的(2S，3R，4S)-4-羟基异亮氨酸以外，还以约为9∶1的比例含有其他立体异构体(2R，3R，4S)-4-羟基异亮氨酸(非专利文献2)，即使重复使用色谱或重结晶，也不容易分离上述立体异构体。

专利文献8中，虽然通过用离子交换树脂进行的色谱和重结晶从100g脱脂的Fenugreek种子中得到0.6g纯度为99％的(2S，3R，4S)-4-羟基异亮氨酸，但是认为该回收率并不高。原因在于特别是在重结晶时由于其特性而无法避免目标物向滤液中的流失，越进行重结晶其回收率越降低。

合成法中，由于副反应等常常含有立体异构体，为了除去上述杂质，需要HPLC或重结晶之类繁琐的操作。上述操作中伴有成本面或设备面大型化困难、收率降低的问题。

如上所述，现有的4-羟基异亮氨酸的纯化方法中还存在着问题，因此期待更有效且简便的方法。

[专利文献1]欧州专利第587476号说明书

[专利文献2]国际公开第2001/015689号小册子

[专利文献3]国际公开第2005/039626号小册子

[专利文献4]国际公开第2005/021596号小册子

[专利文献5]国际公开第2004/087091号小册子

[专利文献6]特开2006-89449号公报

[专利文献7]美国专利申请第2006/0223884号说明书

[专利文献8]美国专利第5470879号说明书

[专利文献9]国际公开第2005/084323号小册子

[专利文献10]国际公开第2004/099120号小册子

[专利文献11]国际公开第2006/051000号小册子

[非专利文献1]Phytochemistry，vol.12，1707-1711，1973

[非专利文献2]Phytochemistry，vol.15，325，1976

[非专利文献3]Phytochemistry，vol.28，1835-1841，1989

[非专利文献4]Diabetes，Vol.47，Issue 2206-210，1998

[非专利文献5]American Journal of Physiology Endocrinology andMetabolism，Vol.287，E463-E471，2004

[非专利文献6]Amino Acids，vol.28，71-76，2005

[非专利文献7]European Joumal of Organic Chemistry，vol.5，834-839，2002

发明内容

发明所要解决的课题

本发明的目的在于提供简便、高纯度且高收率地分离纯化(2S，3R，4S)-4-羟基异亮氨酸或其化学上可接受的盐(以下有时也称为“(2S，3R，4S)-HIL”)的方法。

另外，本发明的目的还在于提供从混合物中简便地分离除去(2S，3R，4S)-4-羟基异亮氨酸的方法。