[发明专利]用于生物分子纯化的方法无效
申请号: | 200880011329.0 | 申请日: | 2008-03-20 |
公开(公告)号: | CN101675163A | 公开(公告)日: | 2010-03-17 |
发明(设计)人: | F·威莫尔;A·舒尔茨;C·弗里茨;C·迪内曼;A·谢弗 | 申请(专利权)人: | 恰根有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/68;B04B1/00 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 | 代理人: | 韦 东 |
地址: | 德国*** | 国省代码: | 德国;DE |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 生物 分子 纯化 方法 | ||
1.一种用于从样本中纯化生物分子的方法,所述方法包括以下步骤:
a)将含有结合基质的反应容器放置在离心机中,其中在这一步骤之前或之 后在所述反应容器中制备含有生物分子的样本溶液或悬浮液或将其导入所述 反应容器中;以及
b)包括至少一个多级离心步骤,所述步骤包括至少一个具有第一个加速度 值的第一个离心步骤和至少一个具有大于所述第一个加速度值的第二个加速 度值的第二个离心步骤;其中
c)步骤b)可以是结合步骤、洗涤步骤和/或洗脱步骤。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述生物分子是选自下组的物 质:核酸、氨基酸、寡肽、多肽、单糖、寡糖、多糖、脂肪、脂肪酸和/或脂质。
3.如前述权利要求之一所述的方法,其特征在于,所述结合基质包括阴离 子交换剂、硅酸盐基材、塑胶基材或含脱乙酰壳多糖基材。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述结合基质包含硅酸盐基材, 并且所述含生物分子的样本在离心前与至少一种离液盐混合。
5.如前述权利要求之一所述的方法,其特征在于,所述方法之前对含有生 物分子的细胞或组织进行裂解步骤。
6.如权利要求4或5所述的方法,其特征在于,所述离液盐是选自下组的 盐或盐的混合物:盐酸胍、异硫氰酸胍、碘化胍、尿素、硫酸铵、碘化钠、碘 化钾、高氯酸钠、(异)硫氰酸钠和硫氰酸胍。
7.如前述权利要求之一所述的方法,其特征在于,所述第一个离心步骤在 加速度值为5-2000xg的区间内进行。
8.如前述权利要求之一所述的方法,其特征在于,所述第二个离心步骤在 加速度值为100-25000xg的区间内进行。
9.如前述权利要求之一所述的方法,其特征在于,所述反应容器在“外旋 式”离心转子中离心。
10.如前述权利要求之一所述的方法,其特征在于,所述方法的各个步骤 通过自动化程序进行。
11.一种用于如权利要求1-10之一所述的从样本中纯化生物分子的方法的 含有结合基质的反应容器。
12.一种用于如权利要求1-7之一所述的从样本中纯化生物分子的方法的 组合物,其特征在于,所述组合物包括至少一种选自下组的组分:碱性试剂、 苯酚、裂解酶、异戊醇、氯仿(裂解缓冲液)、离液盐(结合缓冲液)、醇(结合缓 冲液)以及无机或有机盐(洗脱缓冲液)。
13.一种包含至少一种如权利要求12所述的组合物的试剂盒。
14.如权利要求13所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒进一步包含
(a)至少一个如权利要求11所述的反应容器,以及
(b)用于对生物样本中或来自生物样本的生物分子进行分析或用于分析生 物样本形态学的试剂。
15.一种包括离心机的用于从样本中纯化生物分子的装置,其特征在于, 所述装置包含能够通过在离心过程中无需用户干预的自动化程序进行具有不 同水平加速度值的至少两个离心步骤的机构。
16.一种包含用于进行如权利要求1-10之一所述的从样本中纯化生物分子 的方法的机构的离心装置。
17.如权利要求16所述的离心装置,其特征在于,所述离心装置包含用于 自动化进行如权利要求1-10之一所述的从样本中纯化生物分子的方法的机构。
18.一种可通过如权利要求1-10之一所述方法、如权利要求11所述的反应 容器、如权利要求12所述的组合物、如权利要求13-14之一所述的试剂盒和/ 或如权利要求15-17之一所述的装置进行制备的纯化的核酸。
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