[发明专利]人Fcγ受体Ⅲ

说明书

技术领域

本发明涉及人免疫球蛋白受体领域。本文报告了在人胚肾细胞和中国仓鼠卵巢细胞中重组表达的人Fcγ受体IIIa，本发明特别涉及其糖结构(glycostructure)。

发明背景

免疫球蛋白一般包括两条轻的多肽链和两条重的多肽链。每条重的多肽链和轻的多肽链均包括可变区(一般是多肽链的氨基末端部分)，其包括能与抗原特异性相互作用的一个或多个结合结构域。每条重的多肽链和轻的多肽链也均包括恒定区(一般是羧基末端部分)。重链的恒定区介导了免疫球蛋白与例如带有Fcγ受体(FcγR)的细胞，如吞噬细胞，或与带有也称为Brambell受体的新生Fc受体(FcRn)的细胞的结合。它也介导与包括经典补体系统的因子如成分(C1q)的一些因子的结合。

免疫球蛋白分子分为五种不同的种类：IgA(A类免疫球蛋白)、IgD、IgE、IgG和IgM。在这些种类中，免疫球蛋白的区别在于它们的总体结构，但结构单元是非常相似的。

Hulett和Hogarth(Hulett，M.D.和Hogarth，P.M.，Adv.Immunol.57(1994)1-127)报道，G类免疫球蛋白Fc部分的胞外受体是一族包括具有不同结合特异性的三种不同受体类型的跨膜糖蛋白：FcγRI、FcγRII和FcγRIII。I类受体与未复合化的IgG相互作用，而II类受体和III类受体优选与复合化的IgG相互作用。人FcγRIII(CD16)存在两种同种型和两种多态型。第一种同种型FcγRIIIa是由与第二同种型FcγRIIIb不同的基因编码的跨膜分子，其是GPI-锚定的膜蛋白。第一种多态型V159在氨基酸序列的位置159具有缬氨酸残基，而第二种多态型F159在位置159具有苯丙氨酸残基。

Takahashi等人(Takahashi，N.，等人，Glycobiology 12(2002)507-515)报道了在BHK细胞中生产的重组人可溶FcγRIII的N-糖基化模式。Galon等人(Galon，J.，等人，Eur.J.Immunol.27(1997)1928-1932)报道了FcγRIIIb胞外域和单体人IgG亚类间的相互作用的亲合力。Nagarajan等人(Nagarajan，S.，等人，J.Biol.Chem.270(1995)25762-25770)报道了CD16同种型的配体结合和吞噬作用。EP-A-1 314 741报道了双特异性抗CD19x抗CD16抗体及其用途。

本发明的目的是提供人Fcγ受体RIIIa的确定的糖结构，即提供结合到人Fcγ受体RIIIa的特异性位点的寡糖的列表。

发明概述

本发明包括Fcγ受体的糖结构领域的多个方面。第一方面是具有SEQID NO：1所示的氨基酸序列并在SEQ ID NO：1的氨基酸位置163包括下述N-连接寡糖之一的重组人Fcγ受体RIIIa：

HexNAc(β1→4)[Fuc(α1→3(6))]GlcNAc(β1→2)Man(α1→6(3))[HexNAc(β1→4)GlcNAc(β1→2)Man(α1→3(6))]Man(β1→4)GlcNAc(β1→4)[Fuc(α1→6)]GlcNAcβ1-，或

HexNAc(β1→4)[Fuc(α1→3(6))]GlcNAc(β1→2)Man(α1→6(3))[Man(α1→6)Man(α1→3(6))]Man(β1→4)GlcNAc(β1→4)[Fuc(α1→6)]GlcNAcβ1-，或

HexNAc(β1→4)[Fuc(α1→3(6))]GlcNAc(β1→2)Man(α1→6(3))[HexNAc(β1→4)[Fuc(α1→3(6))]GlcNAc(β1→2)Man(α1→3(6))]Man(β1→4)GlcNAc(β1→4)[Fuc(α1→6)]GlcNAcβ1-，或

HexNAc(β1→4)[Fuc(α1→3(6))]GlcNAc(β1→2)Man(α1→6(3))[Man(α1→6)Man(α1→6)Man(α1→3(6))]Man(β1→4)GlcNAc(β1→4)[Fuc(α1→6)]GlcNAcβ1-，或

HexNAc(β1→4)[Fuc(α1→3(6))]GlcNAc(β1→2)Man(α1→6(3))[Man(α1→6(3))Man(α1→3(6))]Man(β1→6)GlcNAc(β1→4)[Fuc(α1→6)]GlcNAcβ1-，+HexNAc，或