[发明专利]制备含骨钙素提取物的方法

说明书

技术领域

[0001]

本发明涉及制备含活性骨钙素的提取物的方法；由该制备方法得到的提取物；含该提取物的食物或饮料产品、药物、口腔护理组合物和饲料；和含由骨得到的骨钙素的生长促进剂。

背景技术

[0002]

活性骨钙素又称为含Gla的骨蛋白，为由成骨细胞、骨形成细胞合成的特征性非胶原蛋白，且其存在于细胞外基质中。据报道，活性骨钙素占骨非胶原蛋白的10-20％。

[0003]

人骨钙素分子含49个氨基酸，其中分子中的谷氨酸残基通过依赖维生素K的翻译后修饰转化为γ-羧基谷氨酸(Gla)残基。γ-羧基化骨钙素分子含3个Gla残基(在17、21和24位)。活性维生素D促进成骨细胞中γ-羧基化骨钙素的生物合成。γ-羧基化骨钙素称为活性骨钙素，因为它能够通过Gla残基与钙结合，据报道，由于该功能，所以它涉及骨钙化。因为一部分骨钙素分子分泌到血液，所以用血清骨钙素水平作为骨形成和骨代谢病的指数。

[0004]

在人类中，矿物质的摄取量低于需要量不利于保持好的健康。尤其是，已知缺钙不仅增加骨病例如骨质疏松的风险，而且还影响肌肉和神经组织的功能。为加强包括钙在内的矿物质的吸收，对作为矿物质吸收促进剂的Gla的利用进行了研究，Gla对钙具有亲和力；据报道，含Gla的骨钙素可用作该促进剂的原料(专利文件1)。

[0005]

仅有少数由生物材料制备活性骨钙素的方法的报道。已有将鸡骨中骨钙素和骨桥蛋白选择性溶解的方法的报道(非专利文件1)。该文件中公开的方法是用含乙二胺四乙酸(EDTA)的溶剂提取。

[0006]

除上述用含EDTA的溶剂提取的方法外，还已知用酸提取骨中骨钙素的提取方法；但是，这些方法的提取效率不理想(非专利文件2)。

[0007]

在另一方面，用热水提取家畜动物骨，提取物用作食物汤和天然调味品的原料。但是，提取后骨残渣无有效用途；如果再利用它们，它们至多用作肥料。因此，需要骨残渣的更有效应用。

[0008]

专利文件1：JP 6-70719A

非专利文件1：Calcif.Tissue Int.，55：230-235(1994)

非专利文件2：Methods Enzymol.，107：516-544(1984)

发明内容

本发明解决的问题

[0009]

如上所述，需要开发有效利用骨的方法。在提取骨中骨钙素的常规已知方法中，用生骨作原料，用含EDTA的溶剂或酸性溶剂提取。但是，当用于食品时，EDTA的使用和用量受到限制，因此，在食品制备中EDTA的使用是不适当的。即使引入除去EDTA的步骤来避免该问题，也难以完全除去EDTA。另外，该步骤的引入还会增加生产成本。与用EDTA的方法相比，在使用酸的方法中不可能得到充分的提取效率。另外，关于用生骨为原料，它们的提取物已经用作食品。

[0010]

因此，本发明的目的是有效提取骨中活性骨钙素，提供适合用作食品的富含活性骨钙素的提取物。

解决问题的方法

[0011]

在热处理骨中有用蛋白例如活性形式的骨钙素，例如用热水提取的那些的存在在现有技术中尚未发现。本发明发明人通过使用食品添加剂和全面利用食物处理技术对热处理骨进行各种提取处理。结果，本发明发明人意外地发现，可提取高浓度活性骨钙素，提取效率良好，且可制备安全性优良和富含活性骨钙素的提取物。本发明发明人还建立了从未热处理的生骨提取活性骨钙素的方法，从而完成本发明，开发由骨得到活性骨钙素的用途。

[0012]本发明的第一个方面涉及制备含活性骨钙素的提取物的方法，该方法包括用溶剂从热处理骨中提取的步骤。在本发明的第一方面的实施方案中，热处理可以是湿热处理，用于提取的溶剂可以是酸性或碱性水溶液。热处理骨的实例包括除去猪骨汤后剩余的煮熟的骨。

[0013]

本发明的第二方面涉及制备含活性骨钙素的提取物的方法，该方法包括用碱性水溶液从未热处理骨中溶剂提取的步骤。

在本发明的第一或第二方面的实施方案中，pH8-12的碱性水溶液或碳酸盐和/或碳酸氢盐水溶液可用作所述碱性水溶液。该方法还可包括将含活性骨钙素的提取物脱盐的步骤。

[0014]

本发明的第三方面涉及用本发明第一或第二方面的方法制备的含活性骨钙素的提取物。

[0015]