[发明专利]显性基因抑制性转基因及其使用方法

权利要求书

1.控制植株或植株细胞中感兴趣基因的等位变异体表达的方法， 所述方法包括：

(a)采用靶向启动子的pIR构建体沉默所述感兴趣基因，所述启 动子驱动所述感兴趣基因的表达；和

(b)表达与第二启动子可操作性连接的所述等位变异体。

2.权利要求1的方法，所述方法包括将权利要求1的植株作为第 一植株，另外包括步骤(c)，其中第二植株与所述第一植株杂交，其中 所述第二植株包含靶向第二启动子的pIR构建体。

3.权利要求1或权利要求2的方法，其中所述感兴趣基因为内源 性基因。

4.植株对，其中第一植株包含：

(a)与感兴趣基因可操作性连接的第一启动子；

(b)靶向所述第一启动子的pIR构建体；

(c)包含与感兴趣基因的等位变异体可操作性连接的第二启动子 的构建体；且

第二植株包含靶向第二启动子的pIR构建体。

5.控制第一植株中突变表达的方法，所述方法包括：

(a)用包含与多核苷酸可操作性连接的启动子的构建体转化所述 第一植株，其中所述多核苷酸的表达将互补突变；

(b)提供包含靶向(a)部分所述启动子的pIR构建体的第二植株； 和

(c)任选地，杂交所述第一和第二植株。

6.权利要求5的方法，其中所述突变对植株为致死性的。

7.植株对，所述植株对包括：

(a)第一植株，所述植株包含

(i)感兴趣基因的突变和

(ii)包含与异源多核苷酸可操作性连接的启动子的构建体，其中 所述多核苷酸的表达将互补突变；和

(b)包含靶向第一植株所述启动子的pIR构建体的第二植株。

8.包含四种多核苷酸的植株育种对，其中：

(a)所述对的第一植株包含：

(i)编码基因产物并与启动子A可操作性连接的第一多核苷酸， 和

(ii)编码靶向启动子序列B的pIR多核苷酸的第二多核苷酸，其 中启动子B不存在于所述第一植株中；

(b)所述对的第二植株包含：

(iii)编码基因产物并与所述启动子B可操作性连接的第三多核 苷酸，和

(iv)编码靶向所述启动子A的pIR多核苷酸的第四多核苷酸，其 中启动子A不存在于所述第二植株中。

9.权利要求8的植株育种对，其中所述四种多核苷酸的一种或多 种为外源性的。

10.权利要求8的植株育种对，其中所述基因产物影响相同的表 型性状。

11.权利要求10的植株育种对，其中所述性状为雄性能育性。

12.权利要求10的植株育种对，其中所述性状为雌性能育性。

13.权利要求8的植株育种对，其中：

(a)所述第一多核苷酸选自编码玉米MS45、玉米BS7、玉米5126 以及拟南芥和稻的相应直系同源物的多核苷酸；

(b)所述第二启动子选自稻MS45、稻BS7、稻5126、拟南芥BS7、 拟南芥5126和拟南芥MS45启动子；

(c)所述第三多核苷酸选自编码玉米MS45、玉米BS7、玉米5126 以及拟南芥和稻的相应直系同源物的多核苷酸；

(d)所述第一启动子选自稻MS45、稻BS7、稻5126、拟南芥BS7、 拟南芥5126和拟南芥MS45启动子。

14.从显示所述表型的亲本产生缺乏特定表型的植株的方法，所 述方法包括杂交权利要求10的植株育种对。

15.权利要求8的植株的细胞。

16.权利要求8的植株的种子或子代。