[发明专利]蝎毒素基因转化的杀虫真菌工程菌株及应用

权利要求书

1.一种编码北非蝎神经毒素多肽AaIT的多核苷酸，其特征在于，所述的多 核苷酸的序列选自下组：

(a)SEQ ID NO:1中第163-375位所示的核苷酸序列；

(b)SEQ ID NO:1中第106-375位所示的核苷酸序列；

(c)SEQ ID NO:1中第1-375位所示的核苷酸序列。

2.权利要求1所述的多核苷酸的用途，其特征在于，用于制备防治鳞翅目昆 虫或鞘翅目昆虫的制剂。

3.一种构建物，其特征在于，所述的构建物从5’至3’依次含有以下元件：

启动子，其是MCL1基因ATG翻译起始位点上游2769bp核苷酸序列的多 核苷酸，其通过以下方法获得：以绿僵菌基因组DNA为模板，以SEQ ID NO:4 和SEQ ID NO:5所示序列的引物通过PCR扩增获得；和

目的基因；其是权利要求1所述的编码北非蝎神经毒素多肽AaIT的多核苷酸。

4.如权利要求3所述的构建物，其特征在于，在启动子和目的基因之间，还 包含：核糖体翻译识别元件，和/或信号肽编码元件。

5.如权利要求4所述的构建物，其特征在于，

所述的核糖体翻译识别元件的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第9-105位所示；

所述的信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:2中1-19位所示。

6.一种载体，其特征在于，所述的载体含有权利要求1所述的多核苷酸或权 利要求3-5任一所述的构建物。

7.一种细胞，其特征在于，所述的细胞是重组真菌细胞，且：

含有权利要求6所述的载体；或

其基因组中整合有外源的权利要求1所述的多核苷酸或权利要求3-5任一所 述的构建物；所述真菌是绿僵菌或白僵菌。

8.一种孢子，其特征在于，所述的孢子由权利要求7所述的细胞产生。

9.一种防治昆虫的制剂，其特征在于，所述的制剂含有(a)权利要求7所 述的细胞和/或权利要求8所述的孢子；以及(b)农药学上可接受的载体；所述的 昆虫是鳞翅目昆虫或鞘翅目昆虫。

10.一种防治昆虫的方法，其特征在于，所述方法包括：给予需要防治昆虫 的对象或场所施用权利要求8所述的孢子；所述的昆虫是鳞翅目昆虫或鞘翅目昆 虫。