[发明专利]还原酶、其基因及其利用方法

说明书

技术领域

本发明涉及新型还原酶和编码该还原酶的DNA、包含该DNA的重组 载体、和用该重组载体进行转化的转化体等。本发明还涉及使用新型还原 酶或该转化体的作为光学活性醇的光学活性苯乙醇酸化合物的制造方法。

背景技术

光学活性的邻位取代的苯乙醇酸化合物是在医农药等的制造中有用的 化合物，迄今为止提出了使用不对称还原试剂的制造方法等，在国际公开 号WO0210101号记载的方法中，为了提高光学纯度而在反应后进一步进 行再结晶等，在有机快报(Organic Letters)，2005，第7卷，24号，5425-5427 页中记载的反应中，反应的光学收率也未必可以称为充分。另外，迄今为 止还不知道使用微生物等将邻位上具有取代基的立体上处于复杂环境的 苯乙醛酸化合物的酮基还原，从而不对称还原为光学活性的苯乙醇酸化合 物的方法。

发明内容

本发明提供以良好的光学收率将邻位上具有取代基的苯乙醛酸化合物 还原为光学活性的苯乙醇酸化合物的方法。

更具体而言，本发明提供能够将邻位取代的苯乙醛酸化合物不对称还 原、以良好的光学收率制造光学活性的邻位取代的苯乙醇酸化合物的蛋白 质、编码该蛋白质的DNA(以下，简称为本发明DNA)、包含该DNA的转 化体、从该DNA制造该蛋白质的方法以及使用该蛋白质对邻位取代的苯 乙醛酸化合物进行不对称还原从而制造对应的光学活性的邻位取代的苯 乙醇酸化合物的方法。

即，本发明提供如下所述等，即：

1.由下述的任何碱基序列构成的DNA：

a)对用序列编号1表示的氨基酸序列进行编码的碱基序列；和

b)用序列编号2表示的碱基序列。

2.一种DNA，其特征在于，通过将能够在宿主细胞内发挥功能的启 动子与具有下述a)～d)中的任何碱基序列的DNA以能够发挥功能的形式连 接而形成：

a)对用序列编号1表示的氨基酸序列进行编码的碱基序列；

b)相对于由编码序列编号1所示的氨基酸序列的碱基序列构成的DNA 具有至少90％序列同源性的DNA的碱基序列，并且是对如下所述蛋白质 的氨基酸序列进行编码的碱基序列，所述蛋白质具有将邻位取代的苯乙 醛酸化合物不对称还原来生产对应的光学活性的邻位取代的苯乙醇酸 化合物的能力；

c)在严格条件下与由编码序列编号1所示的氨基酸序列的碱基序列构 成的DNA杂交的DNA的碱基序列，并且是对如下所述蛋白质的氨基酸 序列进行编码的碱基序列，所述蛋白质具有将邻位取代的苯乙醛酸化合 物不对称还原来生产对应的光学活性的邻位取代的苯乙醇酸化合物的 能力；和

d)用序列编号2表示的碱基序列。

3.一种重组载体，其特征在于，包含上述第1或2项所述的DNA。

4.一种转化体，其特征在于，通过将上述第2项所述的DNA或上述 第3项所述的重组载体导入宿主细胞而形成。

5.根据上述第4项所述的转化体，其特征在于，宿主细胞为微生物。

6.根据上述第4项所述的转化体，其特征在于，宿主细胞为大肠杆菌。

7.一种转化体，其特征在于，包含具有下述的任何碱基序列的DNA：

a)对用序列编号1表示的氨基酸序列进行编码的碱基序列；

b)相对于由编码序列编号1所示的氨基酸序列的碱基序列构成的DNA 具有至少90％序列同源性的DNA的碱基序列，并且是对如下所述蛋白质 的氨基酸序列进行编码的碱基序列，所述蛋白质具有将邻位取代的苯乙 醛酸化合物不对称还原来生产对应的光学活性的邻位取代的苯乙醇酸 化合物的能力；

c)在严格条件下与由编码序列编号1所示的氨基酸序列的碱基序列构 成的DNA杂交的DNA的碱基序列，并且是对如下所述蛋白质的氨基酸序 列进行编码的碱基序列，所述蛋白质具有将邻位取代的苯乙醛酸化合物 不对称还原来生产对应的光学活性的邻位取代的苯乙醇酸化合物的能 力；和

d)用序列编号2表示的碱基序列。

8.一种转化体的制造方法，其特征在于，包括将上述第3项所述的重 组载体导入宿主细胞的步骤。

9.一种蛋白质，具有下述的任何氨基酸序列：

a)用序列编号1表示的氨基酸序列；和