[发明专利]地衣芽孢杆菌α-淀粉酶的改良变体

权利要求书

1.编码变体SEQ ID NO：1的分离的核酸，其中所述变体与SEQ IDNO：1相比包含至少一个氨基酸取代、插入或缺失，且其中编码的变体表现α-淀粉酶活性。

2.权利要求1的核酸，其中所述至少一个氨基酸取代、插入或缺失导致编码的变体包含对应于SEQ ID NO：2所示芽孢杆菌属物种707号α-淀粉酶氨基酸残基的氨基酸残基。

3.权利要求1的核酸，其中所述至少一个氨基酸取代、插入或缺失是在位于编码的变体表面的带电荷残基上进行。

4.权利要求1的核酸，其中所述至少一个氨基酸取代、插入或缺失是在活性位点氨基酸残基上进行。

5.权利要求1的核酸，其中所述至少一个氨基酸取代、插入或缺失是在1位残基外的氨基酸残基上进行。

6.权利要求1的核酸，其中所述变体包含从残基2延伸至残基105和从残基208延伸至残基396的结构域A、从残基106延伸至残基207的结构域B，和从残基397延伸至所述编码的变体C端的结构域C。

7.权利要求6的核酸，其中所述编码的变体在结构域A中具有至少一个氨基酸取代、插入或缺失。

8.权利要求6的核酸，其中所述编码的变体在结构域B中具有至少一个氨基酸取代、插入或缺失。

9.权利要求6的核酸，其中所述编码的变体在结构域C中具有至少一个氨基酸取代、插入或缺失。

10.权利要求1的核酸，其中所述编码的变体包含至少2个替换、插入或缺失的氨基酸。

11.权利要求10的核酸，其中所述编码的变体包含至少5个替换、插入或缺失的氨基酸。

12.权利要求11的核酸，其中所述编码的变体包含至少10个替换、插入或缺失的氨基酸。

13.权利要求12的核酸，其中所述编码的变体包含11至30个氨基酸替换、插入或缺失。

14.权利要求12的核酸，其中所述编码的变体包含11至70个氨基酸替换、插入或缺失。

15.权利要求1的核酸，其中所述编码的变体具有多肽SEQ IDNO：4-15中任一个所示的氨基酸序列。

16.权利要求1的核酸，其中所述编码的变体包含以下氨基酸替换、插入或缺失中的一个或多个：K23N、Q26R、A33K、T49A、A52N、H68N、E82Q、K88N、H91K、R93N、D94G、D114L、T116R、D121N、A123N、D124N、R127Q、V128E、I129V、H133Y、L134T、K136E、H140Y、H142D、S148N、Y150H、D152N、H156R、T163V、E167Q、K170R、在172位插入N、Q178R、A181G、S187D、N188T、N190F、K213R、R214N、E222T、F238Y、E250S、K251A、E255N、Y262F、Q264K、H293Y、T297K、R305Q、K306N、K319H、G332E、Q333E、S334A、Q340E、T341E、从TKGDSQREI至IPTHGV---中取代或缺失残基369-377，其中连接号代表缺失、K389E、K392Q、Q393K、A398R、H400N、D416N、V419H、R437W、N444K、E447Q、H450S、E458G、E469N或H471S。

17.分离的宿主细胞，其包含权利要求1-16中任一项的核酸。

18.载体，其包含权利要求1-16中任一项的核酸。

19.宿主细胞，其包含权利要求9的载体。

20.权利要求17或19的宿主细胞，其中所述细胞是微生物。

21.权利要求20的宿主细胞，其中所述微生物是细菌或真菌。