[发明专利]新化合物

权利要求书

1.一种五特异性抗体，其具有对人IL-8、Gro-α、Gro-β、Gro-γ、和ENA-78 的多特异性(或与它们起交叉反应)，并且

a.其重链可变区的CDR序列是SEQ ID NO：13、14、和15，其轻链可变区 的CDR序列是SEQ ID NO：16、17、和18；

b.其重链可变区的CDR序列是SEQ ID NO：19、20、和21，其轻链可变区 的CDR序列是SEQ ID NO：22、23、和24；或者

c.其重链的CDR序列是SEQ ID NO：25、26、和27；

d.其重链由序列SEQ ID NO：11的核苷酸序列编码，其轻链由序列SEQ ID NO：47、59、61、或63的核苷酸序列编码。

2.权利要求1的抗体，其是小鼠单克隆抗体、嵌合抗体、人抗体或人源化 抗体。

3.权利要求1的抗体，其以如通过表面等离振子共振测定的小于10-7M、 10-8M、或10-9M的平衡常数(KD)值结合人IL-8、Gro-α、Gro-β、Gro-γ、 和ENA-78。

4.一种制备五特异性抗体的方法，包括以下步骤：

a.向小鼠中注射完全弗氏佐剂(cFA)中的人IL-8、Gro-α、Gro-β、Gro-γ、 和ENA-78的混合物；

b.向所述小鼠中注射不完全弗氏佐剂(iFA)中的人IL-8、Gro-α、Gro-β、 Gro-γ、和ENA-78的混合物；并

c.向所述小鼠中注射不完全弗氏佐剂中的人IL-8、Gro-α、Gro-β、 Gro-γ、和ENA-78的混合物和一组五种多抗原肽(MAP)，每种MAP 单元由一种来自多肽ID NO：49-53的序列组成；

d.自所述小鼠分离B细胞；

e.将所述B细胞与骨髓瘤细胞融合以形成分泌所述想要的五特异性抗 体的永生杂交瘤细胞；并

f.自所述杂交瘤的培养物上清液分离所述五特异性抗体。

5.一种制备五特异性抗体的方法，包括以下步骤：

a.向小鼠中注射完全弗氏佐剂中的一组五种多抗原肽(MAP)(MAP 组)，每种MAP单元由一种来自多肽IDNO：49-53的序列组成；

b.向所述小鼠中注射不完全弗氏佐剂中的所述MAP组；

c.向所述小鼠中注射不完全弗氏佐剂中的所有人IL-8、Gro-α、Gro-β、 Gro-γ、和ENA-78的混合物和所述MAP组；

d.自所述小鼠分离B细胞；并

e.将所述B细胞与骨髓瘤细胞融合以形成分泌所述想要的五特异性抗 体的永生杂交瘤细胞；并

f.自所述杂交瘤的培养物上清液分离所述五特异性抗体。

6.通过权利要求4或5的方法制备的抗体。

7.权利要求1的抗体，其重链和轻链可变区分别由序列SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：3的核苷酸序列编码。

8.权利要求1的抗体，其重链和轻链可变区分别由序列SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：7的核苷酸序列编码。

9.权利要求1的抗体，其重链可变区由序列SEQ ID NO：9的核苷酸序列编 码。

10.权利要求1的抗体，其重链和轻链可变区分别是氨基酸序列SEQ ID NO： 2和SEQ ID NO：4。

11.权利要求1的抗体，其重链和轻链可变区分别是氨基酸序列SEQ ID NO： 6和SEQ ID NO：8。

12.权利要求1的抗体，其重链可变区是氨基酸序列SEQ ID NO：10。

13.权利要求1的抗体，其可变区是选自以下的至少一种序列：(i)氨基酸序 列SEQ ID NO：2、4、6、8、或10。

14.一种杂交瘤或转染瘤，其生成包含CDR序列SEQ ID NO：13、14、15、 16、17、和18的五特异性抗体。