[发明专利]用于肺部投送的核酸微粒

权利要求书

1.含有多个核酸微粒的组合物，该核酸微粒含有一种或多种核酸 和一种或多种非聚合性阳离子，其中微粒是基本上球形的，在环境温 度下溶于水，并具有0.5微米到5微米的平均粒径，其中微粒不含聚合 性聚阳离子，所述微粒具有归因于核酸与非聚合性阳离子的组合的结 构。

2.权利要求1的组合物，其中不含非核酸基质和非核酸核心。

3.权利要求1的组合物，其中不含非核酸基质、非核酸核心和非 核酸外壳。

4.权利要求1的组合物，所述微粒含有4重量％到10重量％之间 的非聚合性阳离子。

5.权利要求4的组合物，其中非聚合性阳离子选自Ca²⁺、Zn²⁺、 Mn²⁺、Na⁺、Ba²⁺、K⁺、Mg²⁺、Mn²⁺、Co²⁺、Cu²⁺、Fe²⁺、Fe³⁺、Al³⁺和 Li⁺。

6.权利要求1的组合物，其中所述核酸是反义寡核苷酸。

7.权利要求1的组合物，其中所述核酸是siRNA。

8.权利要求1的组合物，其中所述微粒在所述组合物中是单分散 的。

9.含有多个核酸微粒的组合物，该核酸微粒含有一种或多种核酸 和一种或多种非聚合性阳离子，其中微粒是基本上球形的，固体的， 在环境温度下溶于水，并具有0.5微米到5微米的平均粒径，其中所述 微粒含有少于10重量％的一种或多种非聚合性阳离子，以及大于50重 量％的一种或多种核酸，所述微粒具有归因于核酸与非聚合性阳离子的 组合的结构。

10.权利要求9的组合物，其中所述微粒含有少于6重量％的一种 或多种非聚合性阳离子，以及大于60重量％的一种或多种核酸。

11.权利要求1或9的组合物，其中所述核酸被修饰以包含疏水 部分。

12.权利要求11的组合物，其中疏水部分是胆固醇。

13.制造核酸微粒的方法，包括：

a)在足够的温度温育包含硫代磷酸酯化的核酸溶液，与浓度为 0.1M到5M的非聚合性阳离子溶液的混合物足够长的时间，以允许从 所述混合物形成透明的溶液；以及

b)将步骤(a)的溶液冷却到1到10℃的温度，直到含有核酸和非聚 合性阳离子的基本上球形的微粒群形成。

14.权利要求13的方法，还包括向步骤(a)或步骤(b)的混合物中加 入聚合物溶液的步骤。

15.权利要求13的方法，其中步骤(a)中的所述温育温度是从25 ℃到90℃。

16.权利要求15的方法，其中步骤(a)中的所述温育温度是70℃。

17.权利要求13的方法，其中步骤(a)中的所述温育时间是从1分 钟到1小时。

18.权利要求13的方法，还包括(c)分离步骤(b)的微粒。

19.权利要求18的方法，其中所述微粒使用离心通过沉降来分离。

20.权利要求19的方法，还包括(d)将所述分离的微粒重新悬浮在 水性聚合物溶液中，然后使用离心进行微粒的沉降。

21.权利要求20的方法，包括重新悬浮所述被沉降的微粒，并将 所述重新悬浮的微粒冷冻干燥，以产生冻干的微粒。

22.权利要求13的方法，其中所述方法产生了含有基本上球形的 微粒的微球群和/或产生了含有至少55重量％的核酸的微粒。

23.权利要求13的方法，其中用于形成微粒的溶液的pH范围在3 到10之间。