[发明专利]用于计数细胞的方法

权利要求书

1.一种计数样品中的哺乳动物细胞的方法，所述方法包括：

将所述样品引入通道内，其中所述通道的表面涂布有结合部分，所 述结合部分与所述哺乳动物细胞的细胞表面标记特异性结合；

通过让所述哺乳动物细胞与所述结合部分结合将所述哺乳动物细 胞固定在所述通道内；

将等渗、低导电溶液引入所述通道内以减少所述通道中的背景电导 率；

测量所述通道内的阻抗基线；

使所述通道内的所述细胞裂解；

并且在细胞裂解后测量所述通道内的阻抗；

其中自所述阻抗基线起的阻抗水平变化指示所述通道中裂解的哺 乳动物细胞数目。

2.权利要求1的方法，其中所述阻抗变化由于所述裂解导致的从所 述哺乳动物细胞释放细胞内离子而发生。

3.权利要求1的方法，其中所述阻抗变化由于所述裂解导致的从所 述哺乳动物细胞释放核而发生。

4.权利要求1的方法，其中所述通道是微观流体通道。

5.权利要求1的方法，其中测量所述阻抗基线和在细胞裂解后测量 所述通道内的所述阻抗都包括使用选自下述的电极：自顶向下电极、叉 指(IDT)电极和双轨电极。

6.权利要求1的方法，其中所述阻抗在单个频率下进行测量。

7.权利要求6的方法，其中所述单个频率是760Hz。

8.权利要求1的方法，其还包括根据所述样品内所述哺乳动物细胞 数量诊断受试者中的状况，其中所述细胞数目指示所述状况。

9.权利要求8的方法，其中所述样品是人血样。

10.权利要求1的方法，其中所述哺乳动物细胞包括CD4辅助细胞。

11.一种用于计数样品中的细胞的试剂盒，所述试剂盒包括：

微观流体设备，其中所述微观流体设备包括微观流体通道和电极， 以测量所述微观流体通道内的阻抗，且其中所述微观流体通道包括结合 部分能够附着在其上的表面，所述结合部分与细胞的细胞表面标记特 异性结合；

用于确定所述微观流体通道内的基线阻抗的等渗、低导电溶液；和

用于替代所述微观流体通道内的所述等渗、低导电溶液以使所述微 观流体通道内的细胞裂解的裂解性低渗、低导电溶液。

12.权利要求11的试剂盒，其中所述电极选自自顶向下电极、IDT 电极和双轨电极。

13.权利要求12的试剂盒，其中所述裂解性低渗、低导电溶液包括 去污剂。

14.权利要求13的试剂盒，其中所述去污剂选自triton-X和 tween-20。

15.权利要求12的试剂盒，其中所述电极是离子敏感性电极。

16.权利要求15的试剂盒，其中所述离子敏感性电极特异性检测选 自钾、钠和钙离子的离子浓度。

17.权利要求11的试剂盒，其中所述微观流体通道具有10μl的体 积。