[发明专利]用于差异提取的方法和系统无效
申请号: | 200880023150.7 | 申请日: | 2008-05-09 |
公开(公告)号: | CN101796179A | 公开(公告)日: | 2010-08-04 |
发明(设计)人: | Y·刘 | 申请(专利权)人: | 应用生物系统有限责任公司 |
主分类号: | C12M1/18 | 分类号: | C12M1/18;C12Q1/68 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 权陆军;付磊 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 差异 提取 方法 系统 | ||
1.一种用于差异提取精细胞的系统,包括复数个室,其中至少一个室包括选择性精子裂解缓冲液。
2.权利要求1的系统,包括第一室和第二室,所述第一室包括细胞捕获基质,所述第二室包括选择性精子裂解缓冲液。
3.权利要求2的系统,还包括第三室,所述第三室包括复数的DNA结合颗粒。
4.权利要求3的系统,还包括第四室,所述第四室包括洗脱缓冲液。
5.权利要求1的系统,包括:包括细胞捕获基质的第一室;包括细胞洗涤缓冲液的第二室;包括选择性精子裂解缓冲液的第三室;包括复数的DNA结合颗粒的第四室;包括DNA洗涤缓冲液的第五室;和包括洗脱缓冲液的第六室。
6.权利要求5的系统,其中第一,第二,第三,第四,第五和第六室是可拆卸式盒的部分。
7.权利要求5的系统,还包括第七室,所述第七室包括DNA结合缓冲液。
8.权利要求7的系统,其中所述第七室还包括复数的第二种DNA结合颗粒。
9.权利要求7的系统,还包括第八室,所述第八室包括复数的第二种DNA结合颗粒。
10.一种在包括精细胞和非精细胞的生物样品中差异提取精细胞的方法,包括:
(a)将生物样品放入系统的第一室,其中所述第一室包括细胞捕获基质;
(b)利用细胞捕获基质捕获精细胞和非精细胞;
(c)在选择性精子裂解缓冲液中温育细胞捕获基质以及捕获的精细胞和非精细胞以形成精细胞裂解物;
(d)将来自精细胞裂解物的精细胞DNA与复数的DNA结合颗粒结合;和
(e)从所述DNA结合颗粒洗脱精细胞DNA。
11.权利要求10的方法,其中利用细胞捕获基质捕获精细胞和非精细胞包括向细胞捕获基质施加磁力。
12.权利要求10的方法,其中在选择性精子裂解缓冲液中温育细胞捕获基质以及捕获的精细胞和非精细胞发生在所述系统的第一室。
13.权利要求12的方法,其中精细胞DNA与复数的DNA结合颗粒的结合发生在所述系统的第二室。
14.权利要求13的方法,其中从DNA结合颗粒洗脱精细胞DNA发生在所述系统的第二室。
15.权利要求13的方法,其中精细胞裂解物从第一室转移到第二室。
16.权利要求10的方法,其中在选择性精子裂解缓冲液中温育细胞捕获基质以及捕获的精细胞和非精细胞发生在所述系统的第二室。
17.权利要求16的方法,其中精细胞DNA与复数的DNA结合颗粒的结合发生在所述系统的第二室。
18.权利要求17的方法,其中从DNA结合颗粒洗脱精细胞DNA发生在所述系统的第三室。
19.权利要求16的方法,其中利用磁力将细胞捕获基质以及捕获的精细胞和非精细胞从第一室转移到第二室。
20.权利要求10的方法,其中在选择性精子裂解缓冲液中温育细胞捕获基质后,非精细胞仍被细胞捕获基质捕获。
21.权利要求20的方法,其中非精细胞被裂解,并且非精细胞DNA与细胞捕获基质结合。
22.权利要求20的方法,其中非精细胞被裂解,并且非精细胞DNA与复数的第二种DNA结合颗粒结合。
23.一种用于差异提取精细胞的试剂盒,所述试剂盒包括:多室容器,其中至少一个室包括选择性精子裂解缓冲液。
24.权利要求23的用于差异提取精细胞的试剂盒,其中所述多室容器的至少一个室包括细胞捕获基质。
25.权利要求23的用于差异提取精细胞的试剂盒,其中所述多室容器的至少一个室包括复数的DNA结合颗粒。
26.权利要求23的用于差异提取精细胞的试剂盒,其中所述多室容器的至少一个室包括洗脱缓冲液。
27.权利要求23的用于差异提取精细胞的试剂盒,其中所述多室容器包括:包括细胞捕获基质的第一室;包括细胞洗涤缓冲液的第二室;包括选择性精子裂解缓冲液的第三室;包括复数的DNA结合颗粒的第四室;包括DNA洗涤缓冲液的第五室;和包括洗脱缓冲液的第六室。
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