[发明专利]卡介菌多糖核酸提取物在制备治疗病毒性皮肤病的药物中的应用及其注射剂和制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物制药领域。具体说，本发明涉及一种卡介菌多糖核酸 提取物在制备治疗病毒性皮肤病的药物中的应用，以及由该卡介菌多糖核 酸提取物制备的卡介菌多糖核酸注射剂及其制备方法。

背景技术

卡介苗(Bacilli Calmette Guerin，BCG)是一种弱化的牛型分枝杆菌， 是目前预防结核病最有效的疫苗。自1948年以来，全球已有30亿人接种， 其安全性已被证实。BCG除了用于预防结核病以外，还可以用于多种疾 病的治疗，如变态反应性疾病及肿瘤。但是由于其成分复杂，副作用如皮 疹、瘙痒等发生率较高。因此，对BCG进行纯化、提取其中的有效成分 有助于减少其副作用的发生率。卡介菌多糖核酸注射剂是卡介菌多糖核酸 提取物配以灭菌生理盐水制成的免疫调节剂。临床及实验资料均显示，具 有广泛的免疫调节及抗炎作用，在改善免疫功能、抗过敏、抗感染方面具 有良好的疗效，临床用于多种免疫失调或免疫水平下降及过敏性疾病，如 难治性肺结核、支气管哮喘、支气管炎、病毒感染性疾病及皮肤变态反应 疾病等。自从卡介菌多糖核酸注射剂上市后，其作用机制一直是医学研究 的热点，目前研究的成果表明：

卡介菌的主要成分包括脂类、多糖、蛋白和核酸，其中多糖(包括脂 类)和核酸组分发挥着重要的生理功能。在卡介菌中，多糖(主要包括肽 聚糖、阿拉伯半乳糖聚糖和分支菌酸)和脂类常结合在一起，构成细胞壁 的主要成分。目前的研究还表明：BCG细胞壁和其他细胞器上存在可结 合人和动物Toll受体(TLR)的配体，这些配体至少可结合5种Toll受体 (TLR1、TLR2、TLR4、TLR6、TLR9)，当它们同TLR结合促进树突状 细胞(DC)的成熟，并且诱导IL-12的分泌，IL-12对促进Th0细胞向Th1 细胞亚群转化和IFN-γ分泌，从而产生Th1占优势的非特异性免疫反应。

同样，在卡介菌的核酸中含有丰富的CpG基序，CpG基列在体内外 均能激活多种免疫活性细胞，包括树突状细胞(DC)、单核/巨噬细胞、自 然杀伤细胞(NK)、B细胞和T细胞，刺激免疫活性细胞分泌多种细胞因子 并能上调某些表面分子、趋化因子、粘附分子和共刺激分子等，诱导机体天 然免疫系统活化，并产生抗原特异性的获得性免疫应答。

综上所述，BCG及卡介菌多糖核酸注射剂主要是其核酸和多糖通过 识别和结合人体的Toll受体(TLR1、TLR2、TLR4、TLR6、TLR9)，激 活DC、T细胞、B细胞及巨噬细胞等多种免疫活性细胞，刺激多种免疫 活性细胞分泌免疫活性分子(细胞因子、趋化因子、粘附分子和共刺激分 子)而发挥抗微生物感染、抗肿瘤及调节Th1/Th2平衡的作用。

近十年来的体内、体外研究表明：卡介菌多糖核酸注射剂可以特异性 增强机体的Th1型细胞免疫反应，抑制Th2细胞免疫反应，进而调节 Th1/Th2平衡的作用。

研究表明，卡介菌多糖核酸注射剂可增加T细胞及脾细胞膜上IL-2 的表达，促进T细胞克隆增殖及T细胞集落形成，此外卡介菌多糖核酸注 射剂还能增加活化T细胞IFN-γ的分泌，增强巨噬细胞功能。卡介菌多糖 核酸注射剂还能抑制多种过敏反应，稳定嗜碱性和肥大性细胞的功能，减 少IgE的产生。因而，卡介菌多糖核酸注射剂在预防和治疗微生物感染(细 菌、病毒等)、肿瘤的免疫治疗或辅助治疗及纠正Th1/Th2细胞失衡的变 态反应疾病中将具有非常广阔的应用前景。

目前已上市的卡介菌多糖核酸注射剂是通过从卡介菌培养经热酚法 提取的卡介菌多糖核酸提取物配制而成，现行的卡介菌多糖核酸提取物、 卡介菌多糖核酸注射剂的质量标准和工艺按2000版《中国生物制品规程》 执行。2000版《中国生物制品规程》规定的卡介菌多糖核酸提取物质量标 准为：该制剂为多糖、核酸及蛋白混合物，其中多糖为70％～80％左右， 核酸为10％～20％，卡介菌菌体蛋白含量小于1％，杂菌数不超过为100 个/克。2000版《中国生物制品规程》规定的卡介菌多糖核酸注射剂质量 标准为：1ml/支，含卡介菌多糖0.28-0.42mg/ml，核酸不低于30μg。