[发明专利]用作抗体配体的表位定向扩增的方法

说明书

相关专利

本申请要求递交于2007年5月7日的美国临时申请60/928,225、递交于2007年10月16日的美国临时申请60/999,283、递交于2007年10月16日的美国临时申请60/999,284和递交于2008年4月17日的美国临时申请61/124,689的优先权。本申请也是递交于2007年4月13日的美国申请11/787,229的部分继续申请，该申请要求递交于2006年4月13日的美国临时申请60/792,085的优先权。以上列出的所有申请的内容都以全文引用的方式结合于本文。

发明背景

近年来，抗体已经巩固了其作为多种疾病和病症的一类有效治疗药物的地位。目前世界上已批准21种以抗体为基础的药物，还有大批正在完成当中。

单个抗体可能特异性针对一个抗原，也可能识别多个抗原(Notkins，A.L.et al，Curr.Topics Microbiol.Immunol.252：241，2000；De Ciechi，PA et al.，MoI.Divers.1：79，1995)。然而，与相关表位结合的抗体并不保证有治疗效力。抗体可能具有广泛的结合亲和力，而结合构型之间的细微差别可能导致靶蛋白的构象改变，可能调控该抗体与靶蛋白其它抗体或结合伴侣的竞争程度，或可能引发来自识别该抗原-抗体复合物的免疫细胞的各种反应。

而在例如自身免疫性疾病或如移植排斥的病症中，内源抗体量错误攻击自身组织和器官，在疾病某一阶段可作为靶位的已知表位并不一直保持，这使得问题进一步复杂化。这种现象，称为表位扩散，降低了治疗性抗体或预防性抗体与不良内源抗体竞争和干扰其结合的功效，这是因为机体开始将靶蛋白邻近初始表位的部分区域识别为一个新的表位(N.Suciu-Foca et.，al，Immunol.Rev.1998，164：241)。

制备用于治疗的抗体另一障碍是低免疫原性肽和表位。除非使用引发强烈免疫反应的抗原和表位，很难产生或鉴定治疗上有用的抗体。在针对入侵的病原体或抗癌进行的接种和免疫增强治疗领域，尤其是在入侵的病原体导致免疫逃避的情况中，这一现象早已得到公认。下文将进一步讨论用于有效抗体生产或有效免疫接种治疗的免疫反应性增强。试图控制传染性疾病的免疫接种程序采用数世纪前的技术，以在宿主被活有机体感染之前，即安全地在宿主中产生免疫反应，所述传染性疾病包括如天花，脊髓灰质炎，麻疹，腮腺炎，风疹，流感嗜血杆菌，百日咳，破伤风和白喉。在控制传染性疾病的努力中，例如天花，脊髓灰质炎，麻疹，腮腺炎，风疹，流感嗜血杆菌，百日咳，破伤风和白喉，免疫程序中采用的技术具有数百年历史，在宿主被活生物体进行致病感染之前就安全地产生一个免疫反应。这些免疫接种方案需要对宿主引入实际病原体的失活类型，通过此操作产生一个主动免疫应答。尽管通过改变病原体灭活方式或使用佐剂以增强免疫原性改进了上述技术，在对病原体不同类型失活的形式或采用佐剂以加强免疫原性做出技术改进的同时，对于传染性病原体，例如人体免疫缺陷病毒(HIV)，巨细胞病毒，严重急性呼吸综合征冠状病毒，以及如绿脓假单胞菌，淋病双球菌，或结核分枝杆菌等细菌，或一般对传统疫苗治疗不起反应的寄生虫病，例如疟疾，钩虫病而言，仍存在能够对其进行处理的疫苗的开发需求。

采用失活病原体疫苗方法更难以治疗这些传染病原体，细菌和寄生虫病，这是因为这些有机体有能力通过“免疫逃避”躲过宿主的检测。HIV或感冒病毒有能力在不到一年的时间里多次改变其免疫谱，渐进性地排斥甚至是最新生产的疫苗的效力。