[发明专利]用于缀合疫苗的经过修饰的多糖

说明书

1.发明领域

本发明涉及制备免疫原性糖缀合物(特别是用于在受试者中诱导治疗性免疫应答的药物组合物中使用的免疫原性糖缀合物)的方法。本发明的免疫原性糖缀合物包含一种或多种低聚糖或多糖，该低聚糖或多糖通过活性醛基缀合于一种或多种载体蛋白质。因此，本发明提供了制备以下物质的方法：(i)不饱和的微生物的N-酰基衍生物低聚糖或多糖；(ii)不饱和的N-酰基衍生物的新颖的缀合物；以及(iii)糖缀合物组合物，其包含用作一种或多种蛋白质的共价连接体的微生物的不饱和N-酰基衍生物的片段的缀合物分子。本发明另外包括所述免疫原性糖缀合物药物组合物用于预防或治疗感染性疾病的用途。

2.发明背景

在全世界，由革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌引起的微生物感染引起严重的发病率，所述革兰氏阳性菌例如链球菌(Streptococcus)、葡萄球菌(Staphylococcus)、肠球菌(Enterococcus)、芽孢杆菌(Bacillus)、棒状杆菌(Corynebacterium)、李斯特菌(Listeria)、丹毒丝菌(Erysipelothrix)和梭状芽孢杆菌(Clostridium)，所述革兰氏阴性菌例如嗜血杆菌(Haemophilus)、志贺氏菌(Shigella)、霍乱弧菌(Vibriocholerae)、奈瑟氏球菌(Neisseria)和某些类型的大肠杆菌(Escherichiacoli)。例如，链球菌是革兰氏阳性菌的一个大的和变化的属，该属基于链球菌的细胞壁多糖的抗原性和结构而被分成几群(Lancefield，R.C.1933，A serological differentiation of human and other groups ofhemolytic streptococci.J.Exp.Med.57：571-595；Lancefield，R.C.1938，A micro-precipitin technique for classifying hemolyticstreptococci and improved methods for producing antigen.Proc.Soc.Exp.Biol.and Med.38：473-478；其各自被全文并入本文作为参考)。

例如，B群链球菌基于荚膜多糖被分类为若干不同的类型，例如Ia、Ib、II、III、IV、V、VI、VII和VIII型，它们负责产生大部分的致病性。与使用许多其它人细菌性病原体的发现相似，在用于疫苗时，B群链球菌的荚膜多糖可以提供有效的针对这些细菌感染的保护(参见，Wessels等人，1990.Immunogenicity in animals of apolysaccharide-protein conjugate vaccine against type III group BStreptococcus.J.Clin.Invest.86：1428-1433；Wessels等人1993，Stimulation of protective antibodies against type Ia and Ib group Bstreptococci by a type Ia polysaccharide-tetanus toxoid conjugatevaccine.Infect.Immun.61：4760-4766；其各自被全文并入本文作为参考)。

革兰氏阴性菌也是发病率和死亡率的重要原因。在针对b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)细菌(Hib)的多糖-蛋白质疫苗的新近开发和使用之前，Hib细菌感染导致婴儿精神发育迟缓的许多病例。

婴儿和幼年儿童典型地具有差的对多糖抗原的免疫原性应答。这些应答的特征是不依赖T细胞，并且因此不涉及例如记忆、同种型转换或亲和力成熟的重要属性，所述重要属性是赋予针对随后感染的长期免疫学防护所必需的。为了解决在婴儿和幼年儿童对多糖的有效免疫原性应答的缺乏，本领域中已经努力开发用于通过将多糖细菌抗原共价偶联于载体蛋白以形成缀合物分子而将不依赖T细胞的应答转换为T细胞依赖性应答的方法。参见，Jennings等人美国专利第4,356,170号，其全文并入本文作为参考。