[发明专利]用作癌症疫苗的存活蛋白肽

说明书

本申请要求2007年7月19日提交的美国专利申请序列第60/961,206号 的优先权，将其内容纳入本文作参考。

本发明得到国立卫生研究院(National Institute of Health)政府基金的资 助，基金号为NS049309-02。政府对本发明拥有某些权利。

技术领域

本发明一般涉及癌症疫苗，更具体涉及用作癌症疫苗的修饰的存活蛋白 肽。

背景技术

存活蛋白是一种16.5kDa的胞内蛋白质，属于凋亡蛋白抑制剂(IAP)家 族。存活蛋白与有丝分裂纺锤体协同作用以调节细胞分裂。存活蛋白在某些 细胞中在细胞周期的G2/M相表达，在细胞周期进程的该相期间与纺缍体微 管形成中心结合[Zhao J等，(2000)J Cell Sci，113：4363-71；Li F等，(1998) Nature，396：580-4；Fortugno P等，(2002)J Cell Sci，115：575-85]。也证明存 活蛋白能够调节某些胱冬酶功能，直接抑制凋亡[Tamm I等，(1998)Cancer Res，58：5215-20；Conway等，(2000)Blood 95：1435-42；Shin S等，(2001) Biochemistry，40：1117-23]。此外，存活蛋白可抑制细胞周期蛋白D/cdk4复合 物[Fukuda S，Pelus LM.(2002)Cell Cycle，1(5)：322-6]，允许细胞周期进程。 因此，存活蛋白在许多不同细胞位点发挥关键作用以调节细胞周期和抑制凋 亡细胞死亡。

存活蛋白在大多数癌症细胞细胞周期的G(2)/M相期间过度表达，是迄今 为止鉴定的特异性最高的癌症抗原之一。在大部分肿瘤中表达，而在正常成 人组织中几乎检测不到[Overwijk WW等，(1998)J Exp Med，188：277-86； Adida C等，(1998)Am J Pathol 152：43-49]。虽然在一些情况下存活蛋白在受 到促血细胞生成生长因子刺激的CD34(+)造血干细胞和祖细胞中表达，但通 常不在这些细胞的表面表达。[Fukuda S，Pelus LM.(2002)Cell Cycle. 1(5)：322-6]。

除许多其他癌症之外，存活蛋白还在与预后不良有关的恶性胶质瘤中表 达[Kajiwara Y等，(2003)Cancer 97：1077-1083；Sasaki T，(2002)Acta Neuropathol(Berl)104：105-109；Chakravarti A等，(2002)J Clin Oncol， 20：1063-8]。由于存活蛋白在许多不同的癌症类型中表达，因此将其用作肿瘤 疫苗靶点在抗癌疫苗治疗中具有广泛的应用。然而，过去的研究没能鉴定肿 瘤攻击后给予时有效的存活蛋白肽。而且，很少有关于存活蛋白肽在人体中 的潜在效力的数据。因此，仍然需要适合用作抗-存活蛋白癌症免疫疗法的能 够引出强效细胞免疫应答的存活蛋白肽。

发明内容

本发明提供了用于治疗表达存活蛋白的癌症的组合物和方法。该组合物 包含存活蛋白肽模拟物，在野生型存活蛋白蛋白序列的氨基酸位置57处的半 胱氨酸改变为甲硫氨酸。该肽长度为9-23个氨基酸，具有SEQ ID NO：4 (ENEPDLAQMFFCFKELEGWEPDD)的序列或其片段，其中所述片段包括 SEQ ID NO：4的至少9个毗连的氨基酸，所述片段也包含SEQ ID NO：5 (QMFFCF)的序列。与具有野生型存活蛋白序列的肽引出的细胞介导的免疫应 答相比，该肽能够刺激改良的对抗表达存活蛋白的人癌症细胞的人细胞介导 的免疫应答。还证明该肽能够延长小鼠胶质瘤模型的存活。

本发明方法包括给予诊断患有或者疑似患有表达存活蛋白的癌症的个体 包含本发明肽的组合物，从而抑制癌症生长。

还提供了加载有本发明肽的基本纯化的哺乳动物树突细胞群。

附图简述

图1提供了野生型和本发明中使用的经改变的肽序列的总结。

图2提供了野生型和经改变的肽序列的比较图，以加框形式显示了MHC I类(HLA-A*0201)表位。所有本发明肽共有的序列(QMFFCF)在存活蛋白-53- 67/57M中以斜体标出。

图3提供了存活蛋白肽结合试验获得的体外试验数据的图示。