[发明专利]体外诊断结肠直肠癌的埃兹蛋白测定方法

说明书

本发明涉及癌学领域。更特别地，本发明提供了通过确定取自患者的 生物学样品中埃兹蛋白的存在而体外诊断人类患者中的结肠直肠癌的方 法，所述方法可用于早期诊断、筛选、治疗随诊以及预后，还可用于结肠 直肠癌的复发诊断。

结肠直肠癌(CRC)是主要的公共健康问题。据估计1996年其在世界范 围的新发病例为875000例¹。考虑到男女性别，其是最常在西方国家发生 的癌症，其通常被分类为癌症所致死亡的前3个主要因素之一。考虑到所 有阶段，5年存活率在60％范围内。

只有早期诊断才能赋予治愈性治疗的希望。然而，目前还没有血清学 筛选检验，也没有早期特异性诊断检验方法。

目前在欧洲使用两种不同方法筛选结肠直肠癌：首先，使用临床异常 性(paraclinical)检验，其包括检查粪便中是否存在血(Faecal Occult Blood Test-FOBT，例如以名称销售)。已经证实这个技术的临床实用 性。当每2年对在50-74岁之间的个体使用该技术时，可以使结肠直肠癌导 致的死亡率降低15-20％²。为此，一半以上的人群必须定期参与筛选，且必 须对阳性检验事件进行结肠镜检查，任选随后进行适当治疗。

然而，这种筛选技术具有如下一些不利之处：

·这个检验的主要缺点是其特别是对于腺瘤(癌前异常增生(dysplastic) 病变)的灵敏性较差，如果腺瘤较大，将导致1/10的病例发展为癌症。

·这个检验也不是非常特异性的。粪便中出现血可以与非肿瘤病变相 关：溃疡性结肠炎、痔疮、肛瘘等。在这种情况中，必须进行结肠镜检查， 结肠镜检查的缺点在后文描述。

·最后，检验难以解释；因此其必须在专业中心由有资格的 能胜任的人员诠释。

也已经描述了特异于人血红蛋白的免疫学检验(Feca，Heme 等)。与相比，它们大概有进步，但是基本上还存在相同 问题。因此，由Enterix公司销售的InSure^TM使得可以检测87％患有CRC 的患者，以及47％具有癌前息肉的患者。这是一种检测粪便中人血红蛋白、 特别是检测这个分子中的珠蛋白部分的检验方法。

第二种筛选方法是在50岁以后对人系统进行结肠镜检查，这样在理论 上可以降低由于结肠直肠癌所致死亡率。然而，对于使用内窥镜进行筛选 的政策，健康个体对这种检查的可接受性太低而不能降低死亡率(已经建立 这个筛选计划的欧洲国家结肠镜检查的顺从水平是大约2％)。结肠镜检查 存在并非不显著的结肠穿孔和出血(0.1％)及死亡(1/10 000)的风险，而且对 于公共卫生事业也是非常昂贵的。此外，结肠镜检查需要非常严格的预先 结肠准备，这在很大程度上解释了顺从性不佳的原因。

长久以来已经描述了可以通过免疫测定化验结肠直肠癌的肿瘤标记 物。所述肿瘤标记物特别是癌胚抗原(CEA)和CA19-9。

CEA用于随诊。由于其灵敏性和特异性不足而不可用于筛选或者早期 诊断结肠直肠癌。这是因为该标记物由其它类型癌症及在良性病变中表达。 无论如何，通过组合CEA与另一种肿瘤标记物如CA19-9或CA72-4可以 增加灵敏性而不丧失其特异性。

CA19-9的生理学改变的原因很罕见，但是其它良性病变(肝胆病症、胰 腺病症)或者恶性病症可以导致CA19-9增高。因此，单独这个标记物对于 诊断也无意义。然而，由于其血清浓度与肿瘤的大小和存在转移瘤相关， 因此其也可以用于治疗随诊或者早期证实复发。

另外，已经提议可商购的检验，如：

/ColorectAlert^MD，由Ambrilia销售，其是一种快速且相对 非侵入性CRC的筛选检验。检测患有结肠直肠病变个体的直肠粘 液中的缩醛磷脂(是磷脂的一部分的复合脂质)，而ColorectAlert^MD检测直 肠粘液中的一种复合糖，即T-抗原。/ColorectAlert^MD检验包括将 直肠粘液涂于检验条带上，阳性或阴性结果基于Schiff反应。Ambrilia已 经研究了1787个个体，证实/ColorectAlert^MD检测出54％的早期 结肠直肠癌病例和49％所有阶段组合病例。