[发明专利]用作抵抗空肠弯曲菌的免疫原的荚膜组合物

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求2007年7月27日递交的临时申请系列号No.60/962,313的优 先权，并且本申请为2006年9月20日递交的美国专利申请系列号No. 11/524,057的部分延续申请案，该美国专利申请系列号No.11/524,057要求了 2005年9月21日递交的临时申请系列号No.60/722,086的优先权，并与2006 年9月20日递交的PCT申请PCT/US06/36619有关，上述所有的申请通过引 用而被结合于此。

技术领域

本发明的主题涉及一种免疫原组合物，该免疫原组合物能够赋予蛋白质对 抗由空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)引起的腹泻。本发明还提供了诱导针 对所述组合物的免疫应答的方法。

背景技术

空肠弯曲菌是全球腹泻疾病的主要原因，也是有文件备案的对美国军人的 威胁(泰勒，1992(Taylor，1992)；陶克斯，1992(Tauxe，1992))。弯曲菌 肠炎的症状包括腹泻、腹痛以及发烧，并通常伴随有呕吐。粪便中通常含有粘 液、粪便白细胞和血液，然而也观察到了水性腹泻(卡弗和巴索，1999(Cover and Blaser 1999))。尽管这种有机体对人类疾病具有重大意义，但目前仍没有 得到许可的针对空肠弯曲菌的疫苗。

鉴于空肠弯曲菌在医疗上的重要性，已经做出了大量的研究以期了解这种 病原体。尽管已经做出了努力，但是对于空肠弯曲菌如何引起人类疾病仍然知 之甚少。其中一种菌株NCTC11168(帕克希尔等人，2000(Parkhill，et al.，2000)) 的基因组揭露了有关空肠弯曲菌在生物学上的多个不寻常的方面。一种显著的 特征即是存在超乎想象的大量基因，这些基因对假定参与了糖和/或多糖合成 的酶进行编码(帕克希尔等人，2000(Parkhill，et al.，2000))。基因序列以及 由于序列可利用性而极大地促使进行的研究揭露了这些基因分为四种主要的 官能集群(functional clusters)，它们强调了某些罕有的碳水化合物结构对空肠 弯曲菌的生物学所具有的重要性。这些集群包括脂寡糖(LOS)合成、对鞭毛 蛋白糖基化的基因控制、对N连接的糖基化的基因控制、以及对生物合成和 荚膜聚集进行控制。

由于多株空肠弯曲菌的脂寡糖(LOS)核心与人类神经节苷脂之间的分子 拟态性，针对空肠弯曲菌的疫苗法受到了极大的限制(莫兰等人，1996(Moran， et al.，1996))。这种拟态性被认为是空肠杆菌感染与格林巴利综合症(GBS) 之间存在强关联性的主要因素，格林巴利综合症是一种感染后多发性神经病 (阿罗斯，1997(Allos，1997))。因此，针对LOS核心产生的抗体会引起对人 类神经组织的自身免疫应答。据估计，约有1/3000的弯曲菌肠炎病例导致了 GBS。所以，患上GBS的可能性可能与任何针对包括了神经节苷脂拟态的空 肠弯曲菌的全细胞疫苗有关。

弯曲菌属中的LOS合成由多个基因控制，包括编码对唾液酸进行生物合 成以融入LOS的酶的基因。因此，空肠弯曲菌是少数的能内源性地合成唾液 酸的细菌之一，它还是发现于许多哺乳动物细胞内的9碳糖。这与观察到的 LOS和人类神经节苷脂的分子拟态性相一致(阿斯皮诺尔等人，1993，1994 (a和b)(Aspinall et al.，1993，1994(a and b))，夏洛威等人，1996(Salloway et al.，1996))。

虽然一度认为蛋白质的糖基化作用是属于真核生物的特性，但目前发现到 越来越多的原核生物的糖基化(鲍尔和詹宁斯，2003(Power and Jennings， 2003))。弯曲菌鞭毛蛋白是目前表征最好且糖基化最普遍的细菌蛋白。来源于 81-176菌株的鞭毛蛋白在第19个丝氨酸或苏氨酸的位置被O-键糖基化为假甲 酸(pseudaminic acid)或假甲酸的衍生物(蒂博等人，2001(Thibault et al.， 2001))。假甲酸是一种与唾液酸相似的罕见的9碳糖，但与唾液酸不同的是， 它具有高度的免疫原性。此外，不能对鞭毛进行糖基化的突变无法使鞭毛丝发 生集合(古恩等人，2003(Goon et al，2003))。由于鞭毛是空肠弯曲菌必不可 少的毒力决定因子，因此，糖基化也是重要决定因子。