[发明专利]纯化因子VIII和Von Willebrand因子的方法

权利要求书

1.从选自(i)含有FVIII和FvW的混合物的溶液，(ii)含有FvW的溶液，(iii)源于非人动物的分泌物的溶液，和(iv)源于含有FVIII的植物提取物的溶液来纯化FVIII或FvW的方法，所述方法的特征在于，包括在离子交换色谱过滤型膜上吸附FVIII或FvW的步骤。

2.根据权利要求1的方法，其中所述过滤型膜为阴离子交换色谱膜。

3.根据权利要求1或2的方法，其中所述过滤型膜为强阴离子交换器。

4.根据前述任一权利要求的方法，其中所述膜带有包括季铵基团的包被。

5.根据前述任一权利要求的方法，其中所述膜为大孔型膜。

6.根据前述任一权利要求的方法，其中所述膜为聚醚砜型膜。

7.根据前述任一权利要求的方法，其中所述溶液含有FVIII和FvW的混合物。

8.根据权利要求7的方法，其中所述溶液为血浆源的。

9.根据权利要求8的方法，其包括下述步骤：

a)提供来自血浆的冷沉淀物，

b)在所述离子交换色谱膜上吸附因子VIII和Von Willebrand因子，

c)通过使用具有适当离子强度值的洗脱缓冲液来回收因子VIII或VonWillebrand因子。

10.根据权利要求9的方法，其中根据下述步骤进行Von Willebrand因子和因子VIII的选择性回收：

c1)通过用具有适当离子强度值的缓冲液进行洗脱来选择性回收FvW，

c2)通过用具有高于步骤c1)所用缓冲液的离子强度值的适当离子强度值的缓冲液进行洗脱来选择性回收FVIII。

11.根据权利要求1-9中任一项的方法，其还包括下述步骤：

d)通过增加所述色谱膜的平衡缓冲液的离子强度值来洗脱FvW，

e)在离子交换色谱膜，更优选在与第一膜相同类型的膜上捕获VonWillebrand因子，

f)通过增加所述色谱膜的平衡缓冲液的离子强度值来洗脱VonWillebrand因子。

12.根据权利要求11的方法，其还包括下述步骤：

g)在具有明胶配体的亲和凝胶柱上对权利要求11的步骤c)洗脱的富含Von Willebrand因子的级分进行色谱，

h)回收没有纤连蛋白的未被滞留的Von Willebrand因子级分。

13.生产纯化的FVIII的方法，其包括实施根据权利要求1-10中任一项的方法。

14.生产纯化的FvW的方法，其包括实施根据权利要求1-12中任一项的方法。