[发明专利]单个多能干细胞培养有效
| 申请号： | 200880104926.8 | 申请日： | 2008-06-30 |
| 公开（公告）号： | CN101978044B | 公开（公告）日： | 2017-10-24 |
| 发明（设计）人： | S·内尔逊 | 申请（专利权）人： | 生命扫描有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/06 | 分类号： | C12N5/06 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司72001 | 代理人： | 权陆军,郭文洁 |
| 地址： | 美国加利*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 单个 多能 干细胞 培养 | ||
1.一种用于将作为单细胞的多能干细胞分化成表达胰腺内胚层谱系特征标记的细胞的方法，包括下列步骤：
a.成簇培养多能干细胞，
b.释放该多能干细胞为单细胞，
c.平板接种该单个多能干细胞到组织培养基质上，和
d.分化该单个多能干细胞，
其中，该多能干细胞通过用选自重组胰蛋白酶、TrypLETM SELECT和TrypLETM EXPRESS的酶处理而释放为单细胞，并且该组织培养基质选自作为来自Engelbreth-Holm-Swarm肿瘤细胞的可溶制剂的MATRIGELTM、纤连蛋白、层粘连蛋白、人血清和胶原；并且
其中所述多能干细胞为已经建立的胚胎干细胞系。
2.权利要求1的方法，其中该多能干细胞通过用0.5g/l至2.5g/l浓度的酶处理而释放为单细胞。
3.权利要求1的方法，其中该多能干细胞通过用2.5g/l浓度的酶处理而释放为单细胞。
4.权利要求1的方法，其中该多能干细胞通过用酶处理2至5分钟而释放为单细胞。
5.权利要求1的方法，其中该多能干细胞通过用酶处理5分钟而释放为单细胞。
6.权利要求1的方法，其中该多能干细胞通过用1×至0.001×浓度的TrypLETM EXPRESS处理而释放为单细胞。
7.权利要求1的方法，其中该多能干细胞通过用1×浓度的TrypLETM EXPRESS处理而释放为单细胞。
8.权利要求1的方法，其中该多能干细胞通过用TrypLETM EXPRESS处理2至5分钟而释放为单细胞。
9.权利要求1的方法，其中该多能干细胞通过用TrypLETM EXPRESS处理5分钟而释放为单细胞。
10.权利要求1的方法，其中MATRIGELTM以1∶30至1∶10的稀释度使用。
11.权利要求10的方法，其中MATRIGELTM以1∶10的稀释度使用。
12.权利要求1的方法，其中该组织培养基质是生长因子减少的MATRIGELTM。
13.权利要求12的方法，其中生长因子减少的MATRIGELTM以1∶30至1∶10的稀释度使用。
14.权利要求12的方法，其中生长因子减少的MATRIGELTM以1∶30的稀释度使用。
15.权利要求14的方法，其中该已经建立的胚胎干细胞系是人的。
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