[发明专利]促使长dsRNA可用于哺乳动物和其他所选动物细胞中的基因寻靶

权利要求书

1.包含长的双链RNA(dsRNA)或编码RNA的DNA分子的细菌，其中所述dsRNA包含与靶真核基因或病毒基因的信使RNA(mRNA)序列基本互补的序列。

2.权利要求1的细菌，其中所述细菌能够将dsRNA加工成更短RNA双链体的混合物。

3.权利要求2的细菌，其中所述更短RNA双链体的混合物能够调节真核基因或病毒基因的表达。

4.权利要求1的细菌，其还包含能够将所述dsRNA加工成更短RNA双链体的混合物的酶或核酶。

5.权利要求4的细菌，其中所述酶是内切核酸酶。

6.权利要求1的细菌，其中所述细菌还包含细菌核糖核酸酶III、切酶或切酶样酶。

7.权利要求1的细菌，其中所述细菌能够在引入真核细胞后，在真核细胞中调节真核基因或病毒基因的表达。

8.权利要求1的细菌，其中所述dsRNA长度至少是40bp。

9.权利要求1的细菌，其中所述dsRNA长度至少是70bp。

10.权利要求1的细菌，其中所述dsRNA长度至少是100bp。

11.权利要求1的细菌，其中所述dsRNA长度至少是200bp。

12.权利要求1的细菌，其中所述dsRNA长度至少是400bp。

13.权利要求1的细菌，其中所述dsRNA长度至少是1000bp。

14.权利要求1的细菌，其中所述DNA分子包含控制所述dsRNA表达的一个或多个原核启动子。

15.权利要求14的细菌，其中所述一个或多个原核启动子中的至少一个是T7启动子。

16.权利要求14的细菌，其中所述一个或多个原核启动子中的至少一个对所述细菌是内源的。

17.权利要求1的细菌，其中所述DNA分子包含控制所述DNA分子两条链表达的两个原核启动子。

18.权利要求1的细菌，其中所述真核基因是动物基因。

19.权利要求1的细菌，其中所述真核基因是哺乳动物基因或鸟类基因。

20.权利要求1的细菌，其中所述真核基因是哺乳动物疾病基因。

21.权利要求1的细菌，其中所述真核基因是癌基因。

22.权利要求1的细菌，其中所述真核基因是β-联蛋白。

23.权利要求1的细菌，其中所述真核基因是k-Ras。

24.权利要求1的细菌，其中所述病毒基因是HIV基因。

25.权利要求1的细菌，其中所述细菌是侵入性的。

26.权利要求1的细菌，其中所述细菌是活的。

27.权利要求1的细菌，其中所述细菌是半失活的细菌。

28.权利要求1的细菌，其中所述细菌是非致病性的。

29.权利要求1的细菌，其中所述细菌是治疗性细菌。

30.权利要求1的细菌，其中所述细菌是选自利斯特氏菌、志贺氏菌、沙门氏菌、大肠杆菌和双岐杆菌的减毒菌株。

31.权利要求1的细菌，其中所述DNA分子包含环形双链质粒。

32.权利要求1的细菌，其中所述DNA分子整合到细菌染色体中。

33.权利要求1的细菌，其中所述dsRNA包含与真核基因或病毒基因的mRNA序列完全互补的序列。

34.细菌，其包含能够调节真核基因或病毒基因表达的短RNA双链体混合物。

35.权利要求34的细菌，其中从长的双链RNA(dsRNA)产生所述短RNA双链体的混合物。

36.在至少一个原核启动子控制下编码长的双链RNA(dsRNA)的原核载体，其中所述dsRNA包含与靶真核基因或病毒基因的信使RNA(mRNA)序列基本互补的序列。