[发明专利]MDL-1应用

说明书

发明领域

本发明涉及通过调节MDL-1活性来治疗骨骼病和免疫病的方法。

发明背景

骨组织主要由3种细胞类型(成骨细胞、骨细胞和破骨细胞)和矿化胞间骨基质组成，所述矿化胞间骨基质包含聚合物(主要是胶原蛋白纤维)和由骨细胞(主要是成骨细胞)合成的其它有机物质(主要由诸如硫酸软骨素和透明质酸等蛋白多糖组成的基质)。骨细胞产生骨基质有机分子，也调节其矿化。成骨细胞位于骨组织表面，并合成骨基质的有机组分。骨细胞是成熟的成骨细胞，参与维持骨基质。破骨细胞参与骨质侵蚀和再吸收。

成骨细胞和破骨细胞分化之间的平衡是骨稳态的关键。这种平衡的调节异常可导致过多的破骨细胞活化及骨吸收病(例如骨质疏松症和骨关节炎)。激活TRAF6、c-Fos和NFATc1转录因子的NF-kB配体受体激活剂(RANKL)是重要的提供破骨细胞发育和功能的主要信号的调控细胞因子。源自含有基于免疫受体酪氨酸激活基序(ITAM)的分子的另外的信号对于体内破骨细胞形成也是不必可少的。

DAP12(DNAX Activating Protein，DNAX激活蛋白)是二硫键连接的同型二聚体I型跨膜糖蛋白，其含有位于细胞内结构域的基于免疫受体酪氨酸激活基序(ITAM)(Lanier等(1998)Nature391：703-707；WO 99/06557；Campbell和Colonna(1999)Int.J.Biochem.Cell Biol.31：631-636；Lanier和Bakker(2000)Immunol.Today 21：611-614)。DAP12的重要性依赖于ITAM结构域(Gingras等(2001)Mol.Immun.38：817-824)。因为Ig超家族受体的细胞内结构域(Bouchon等(2000)J.Immunol.164：4991-4995；Dietrich等(2000)J.Immunol.164：9-12)及与DAP12非共价缔合的C-型凝集素超家族(Bakker等(1999)PNAS U.S.A.96：9792-9796)太短，以致不能与其它分子相互作用，所以DAP12细胞质结构域组成这些受体复合体的信号转导亚单位。受体配体-结合亚单位一旦衔接(engagement)，DAP12细胞质ITAM就被Src激酶磷酸化。然后DAP12的ITAM与Syk细胞质酪氨酸激酶相互作用，启动导致激活的事件级联(Lanier等，见上述；Campbell和Colonna，见上述；Lanier和Bakker，见上述)。

DAP12在单核细胞、巨噬细胞、天然杀伤(NK)细胞、粒细胞、树突细胞和肥大细胞中表达，其中它为至少8种不同的受体提供了信号转导功能(Gingras等(2001)Mol.Immun.38：817-824；Lanier和Bakker，(2000)Immunol.Today 21：611-614)。与DAP12缔合的C-型凝集素超家族的骨髓受体为骨髓DAP12缔合凝集素-1(Myeloid DAP12-associating Lectin-1，MDL-1)，它是II型跨膜蛋白(MDL-1也称为CLEC5a)。MDL-1是第一个被鉴定和克隆的缔合DAP12的分子(Bakker等(1999)PNAS USA 96(17)：9792-9796)。它在单核细胞和巨噬细胞(Bakker等(1999)PNAS U.S.A.96：9792-9796)以及其它类型的骨髓细胞(例如嗜中性粒细胞和树突细胞)中专一表达。在DAP12跨膜结构域中带负电荷的残基的存在阻碍DAP12在缺乏配偶体受体(例如MDL-1)时在细胞表面的表达，所述配偶体受体在其跨膜结构域具有带正电荷的残基。然而，仅仅DAP12还不足以在细胞表面进行其表达及发挥功能。因此，与DAP12缔合的分子(例如MDL-1)与DAP12的组合可引起由DAP12传送特定的生理信号(Nochi等(2003)Am.J.ofPathology 162：1191-1201)。