[发明专利]细胞增殖方法以及用于组织修复及再生的药物

权利要求书

1.一种使细胞增殖的方法，是将从活体采集的试样中的细胞在培 养基中培养使之增殖的方法，所述方法包括在含有同种血清的培养基 中，在实质上不与抗凝剂接触的状态下培养细胞，所述同种血清包括自 体和异体，

其中，所述细胞是在实质上不与抗凝剂接触的状态下从活体采集的 细胞，并且所述培养基中的抗凝剂的量小于0.02U/mL，所述抗凝剂为 肝素，所述细胞为间充质干细胞。

2.如权利要求1所述的方法，其中，所述同种血清被检验出对血 清癌标志物及/或感染因子为阴性。

3.如权利要求1所述的方法，其中，同种血清为采集细胞的受试 者自体血清。

4.如权利要求2所述的方法，其中，血清癌标志物为选自铁蛋白、 CEA、AFP、BFP、CA125、CA15-3、CA19-9、CA72-4、STN、DUP AN-2、SLX、ST-439、SPAN-1、SCC、PSA、G-精浆蛋白、TPA、 CYFRA、PAP、NSE、C肽、PIVKA、Pro-GRP、HCGβ、弹性蛋白酶、 β2微球蛋白、S-NTX、抗p53抗体、HER2中的1种或2种以上。

5.如权利要求2所述的方法，其中，感染因子为选自HIV、ATL、 HB、HC、梅毒、人微小病毒B19中的1种或2种以上。

6.如权利要求1～5中任一项所述的方法，其中，使添加到采集的 试样中的抗凝剂的量相对于所述试样的容积小于0.2U/mL。

7.如权利要求1所述的方法，其中，培养基中的血清含量为1～2 0容积％。

8.如权利要求1所述的方法，其中，细胞为人细胞。

9.如权利要求8所述的方法，其中，使细胞在未分化的状态下增 殖。

10.如权利要求9所述的方法，其中，在培养基中的间充质干细胞 的密度达到5,500个/cm²以上的时点下使之进行传代培养。

11.如权利要求10所述的方法，其中，每周至少更换一次培养基。

12.如权利要求11所述的方法，其中，反复进行传代培养直至细 胞的总数达到100,000,000个以上。

13.一种离体培养的人细胞，所述细胞是利用权利要求1所述的方 法增殖的细胞，其特征在于，CD24不表达。

14.一种离体培养的人细胞，所述细胞是利用权利要求1所述的方 法增殖的细胞，其特征在于，由CD9、CD29、CD44、CD47、CD58、 CD59、CD63、CD73、CD81、CD97、CD99、CD105、CD109、CD151、 CD157、CD164、CD166、CD200及CD248组成的CD抗原组中的至少 90％表达，并且由CD1、CD4、CD5、CD6、CD7、CD8、CD14、CD1 9、CD22、CD24、CD28、CD33、CD34、CD37、CD38、CD45、CD48、 CD53、CD68、CD69、CD72、CD74、CD79、CD84、CD86、CD93、C D96、CD117、CD133、CD163、CD177、CD180、CD207、CD209、C D226、CD244、CD247、CD274及CD300组成的CD抗原组中的至少9 0％不表达。