[发明专利]用于乙醇生产的嗜热微生物

权利要求书

1.一种嗜热微生物，包括一种与野生型相比增加淀粉酶基因表达的修饰。

2.权利要求1的微生物，其中所述修饰为将一种异源淀粉酶基因插入至所述嗜热微生物的基因组中，该基因处于一个适合的启动子的控制之下。

3.权利要求2的微生物，其中所述启动子在缺氧条件下起作用。

4.权利要求3的微生物，其中所述启动子为ldh启动子。

5.权利要求4的微生物，其中所述ldh启动子为自体同源的。

6.权利要求4的微生物，其中所述ldh启动子为异源的。

7.权利要求6的微生物，其中所述ldh启动子来源自嗜热脂肪地芽胞杆菌(Geobacillus stearothermophilus)。

8.权利要求2的微生物，其中所述淀粉酶处于一系列强启动子的控制之下。

9.权利要求8的微生物，其中所述强启动子为异源的。

10.权利要求9的微生物，其中所述强启动子包括3-磷酸甘油醛脱氢酶启动子。

11.权利要求9的微生物，其中所述强启动子包括淀粉酶启动子。

12.权利要求10或11的微生物，其中所述启动子来源自嗜热脂肪地芽胞杆菌。

13.前述权利要求任一项的微生物，还包含一种使天然乳酸脱氢酶基因失活的修饰。

14.权利要求13的微生物，其中所述乳酸脱氢酶基因或其一部分已被缺失。

15.权利要求13或其从属权利要求的微生物，其中所述微生物的乳酸脱氢酶基因中不含整合元件。

16.前述权利要求任一项的微生物，还包含一种使天然丙酮酸甲酸裂解酶基因失活的修饰。

17.权利要求16的微生物，其中所述丙酮酸甲酸裂解酶基因或其一部分已被缺失。

18.前述权利要求任一项的微生物，还包括一种上调丙酮酸脱氢酶基因的修饰。

19.权利要求18的微生物，其中将一个基因启动子插入至所述丙酮酸脱氢酶基因的上游，并且其中所述启动子在缺氧条件下起作用。

20.前述权利要求任一项的微生物，还包含一种上调丙酮酸脱羧酶活性的修饰。

21.权利要求20的微生物，其中所述修饰使天然二氢硫辛酰胺乙酰基转移酶基因(EC 2.3.1.12)失活。

22.权利要求20或21的微生物，其中所述二氢硫辛酰胺乙酰基转移酶基因或其一部分已被缺失。

23.前述权利要求任一项的微生物，其中所述淀粉酶基因来源自地芽胞杆菌属(Geobacillus)种。

24.前述权利要求任一项的微生物，其中所述淀粉酶基因来源自嗜热脂肪地芽胞杆菌。

25.前述权利要求任一项的微生物，其中所述淀粉酶基因编码α淀粉酶(EC 3.2.1.1)。

26.前述权利要求任一项的微生物，其中所述微生物为地芽胞杆菌属种。

27.前述权利要求任一项的微生物，其中所述微生物为热葡糖苷酶地芽孢杆菌(Geobacillus thermoglucosidasius)。

28.前述权利要求任一项的微生物，其中所述微生物含有异源丙酮酸脱羧酶基因。

29.前述权利要求任一项的微生物，其中所述微生物含有异源乙醇脱氢酶基因。

30.前述权利要求任一项的微生物，其中所述微生物不含有限制系统。

31.前述权利要求任一项的微生物，其中所述微生物在含有最高达10％w/v乙醇的培养基中是稳定的。

32.前述权利要求任一项的微生物，其中所述微生物可以被高频率转化。

33.前述权利要求任一项的微生物，其中所述微生物在40℃至85℃，优选50℃至70℃的温度下生长。