[发明专利]治疗性抗体的纯化方法和使用方法

说明书

技术领域

本发明涉及免疫球蛋白的制备。更具体地，本发明涉及一种抗-β淀粉状蛋白免疫球蛋白的制备，该免疫球蛋白可适宜于阿耳茨海默病的免疫治疗。

背景

阿耳茨海默病是一种神经变性疾病，其最常见的形式发现于超过65岁的人中。全世界大概有1500万人患有阿耳茨海默病。

阿耳茨海默病的临床迹象的特征为进行性的认知退化、连同与日常生活相关联的活动减少、以及神经精神病学症状或行为的变化。

阿耳茨海默病其特征为由β淀粉状蛋白肽所组成的斑块在脑组织中的积聚。将抗-β淀粉状蛋白抗体给予一种阿耳茨海默病的小鼠模型似乎减少了小鼠大脑中β淀粉状蛋白的沉积，并且恢复或提高了认知功能或者至少认知衰退的速度。

对抗β淀粉状蛋白肽的自然发生的抗体存在于人血清中。将从人血清中获得的人免疫球蛋白制品给予人体内与在脑脊液中β淀粉状蛋白-肽水平的下降相关联。[US2002/0009445.]最近的临床试验资料显示了在用静脉内的免疫球蛋白(“IVIg”)所治疗的阿耳茨海默病患者中行为和认知方面的有益结果(http://www.news-medical.net/？id＝40383)。

然而，此类IVIg制品包含显著量的神经毒性的β淀粉状蛋白肽，并且在抗体亲合性和滴度方面表现出显著的变化。

概述

在碱性条件下提供了抗-β淀粉状蛋白免疫球蛋白的制品，在该条件下β淀粉状蛋白是微溶的，并且因此与抗-β淀粉状蛋白免疫球蛋白重新结合的能力较弱。

一方面，制备一种抗-β淀粉状蛋白免疫球蛋白的一种方法涉及在足以从所述起始的抗-β淀粉状蛋白免疫球蛋白中解离出β淀粉状蛋白、或它的一个片段的碱性条件下处理一种起始的抗-β淀粉状蛋白免疫球蛋白。

适宜地，根据该方法所制备的抗-β淀粉状蛋白免疫球蛋白是基本上不含结合的β淀粉状蛋白的。

另一方面，制备一种组合物的方法涉及在足以从所述起始的抗-β淀粉状蛋白免疫球蛋白中解离出β淀粉状蛋白、或它的一个片段的碱性条件下通过处理一种起始的抗-β淀粉状蛋白免疫球蛋白来制备一种抗-β淀粉状蛋白免疫球蛋白；并且将该抗-β淀粉状蛋白免疫球蛋白与一种可接受的载体、稀释剂或赋形剂相结合。

在又一个方面，提供了一种分离的或纯化的抗-β淀粉状蛋白免疫球蛋白，该免疫球蛋白在足以从所述起始的抗-β淀粉状蛋白免疫球蛋白中解离出β淀粉状蛋白、或它的一个片段的碱性条件下通过处理一种起始的抗-β淀粉状蛋白免疫球蛋白而得以制备。

在仍又一个方面，一种组合物包括一种抗-β淀粉状蛋白免疫球蛋白，该免疫球蛋白在足以从所述起始的抗-β淀粉状蛋白免疫球蛋白中解离出β淀粉状蛋白、或它的一个片段的碱性条件下通过处理一种起始的抗-β淀粉状蛋白免疫球蛋白而得以制备；以及一种可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

在一个实施方案中，该组合物适宜于治疗与β淀粉样蛋白斑相关联的一种疾病或病况，如阿耳茨海默病。

在另又一个方面，在一种哺乳动物体内治疗与β淀粉样蛋白斑相关联的一种疾病或病况的方法涉及给予所述哺乳动物一种抗-β淀粉状蛋白免疫球蛋白，该免疫球蛋白在足以从所述起始的抗-β淀粉状蛋白免疫球蛋白中解离出β淀粉状蛋白、或它的一个片段的碱性条件下通过处理一种起始的抗-β淀粉状蛋白免疫球蛋白而得以制备。

在一个实施方案中，与β淀粉样蛋白斑相关联的疾病或病况是阿耳茨海默病。

其他目的、特征、以及优点从以下详细说明中将会变得明显。给出了详细说明以及具体的实例仅用于解说，因为对于本领域的普通技术人员而言，在本发明的精神和范围之内的不同的变化和变更从这一详细说明中将会变得明显。此外，这些实例显示了本发明的原理，并且不能预期这些实例确切地说明了本发明对于那些对现有技术领域内的普通技术人员而言它是显而易见地有用的所有实例的应用，。

在整个说明书中，除非上下文另有要求，词语“包括”、“包括了”、以及“已包括”应当被理解为是指包含了一个提到的整数或多个整数的组，但不是排除任何其它的整数或多个整数的组。

附图简要说明

图1：在(A)甘氨酸缓冲液(甘氨酸HCl pH 2.5；甘氨酸NaOH pH10.25；甘氨酸NaOH pH 10.75；甘氨酸NaOH pH 11.25；以及甘氨酸NaOHpH 11.75)的存在下ELISA比较抗-β淀粉状蛋白免疫球蛋白制品。