[发明专利]含细胞因子溶液的新组合物

说明书

相关专利申请的交叉引用

依据35USC§119(e)，本申请要求以2007年8月22日提交的美国 临时申请60/965,707和2008年4月30日提交的美国临时申请61/125,960 为优先权基础，这两项临时申请以引用的方式全文纳入本文。

技术领域

本发明的技术领域涉及含细胞因子溶液的新组合物(在本文中称 为“CFS”组合物)，包括持续释放的含细胞因子溶液的新组合物(在本 文中称为“SR-CFS”组合物)；制备这样的新组合物的方法；以及所述 组合物的用途。

背景技术

已经在许多不同的疾病、障碍和损伤的治疗中评估了许多单独的 细胞因子和生长因子的治疗效用。不幸的是，其结果仅部分地令人振 奋。例如，PDGF-BB已被证明可用于治疗糖尿病足溃疡；GM-CSF 在欧洲上市，用于治疗静脉性溃疡和糖尿病足溃疡；HGH(人生长激 素)在美国上市，用于小儿烧伤。失败事件包括BDNF、CNTF和IGF-1， 已经在被设计来测试其治疗ALS的有效性的临床研究中对它们进行 了评估，每个的结果都令人失望；TGFβ2在静脉性溃疡的2期研究中 没有成功；IGF-1和PDGF的组合疗法在糖尿病足溃疡治疗中没有成 功。

虽然不清楚为什么有这么多单独的细胞因子和生长因子在临床中 失败，但是一个理论是所给予的蛋白剂量是非生理性的，即这些剂量 远高于正常出现在体内的生理水平。同时，由于细胞因子和生长因子 在一个给定的生理状况下的复杂相互作用，仅施用一种因子(特别是 异常高水平的因子)无法重现所述生理状况，并且事实上可能会严重 干扰其微妙的平衡。

综合它们在临床中有限的成功，细胞因子和生长因子以及其他基 于蛋白的治疗剂通常比其他药物更难以给予患者。由于蛋白的有效性 与其形状有关，基于蛋白的治疗剂不能经受可能引起其中包含的一种 或多种蛋白解折叠或变性的条件。因此，在基于蛋白的治疗剂的制备、 存储和给药方面需要特别小心。

除了避免任何的蛋白变性之外，经常还需要能够控制随时间给予 患者的蛋白量。这有助于避免患者中的蛋白浓度达到不希望的高或低， 或者距希望的水平偏差太多，而是有助于将患者中的所述治疗剂维持 在稳定水平。为满足这一点，已经开发出或者正在开发许多治疗剂(包 括基于蛋白的治疗剂)的持续释放制剂。基于蛋白的持续释放治疗剂 可通过多种方法进行给药，所述方法包括但不限于片剂或胶囊剂的口 服递送、粉剂的吸入、植入、整合至基质中，或者装入胶囊的治疗剂 的局部外用，蛋白从该治疗剂中随时间逐渐释放。

这些持续释放制剂的制备方法是不同的。一种方法包括将蛋白与 有机溶剂相混合。例如，粉末制剂可通过将蛋白和有机溶剂的混合物 喷雾至液氮中进行制备。另一种方法涉及将蛋白与可生物侵蚀/可生物 降解聚合物溶于有机溶剂所得到的溶液相混合，从而通过凝固所述混 合物而形成包含所述蛋白和所述聚合物的微粒。在又一种方法中，可 将蛋白、粉化制剂或微粒与有机溶剂混合，以产生可注射至患者体内 或外部施用的液体剂或凝胶剂。不幸的是，使用有机溶剂的缺点是它 们有引起蛋白变性的倾向。

添加剂已被用于在存在变性有机溶剂的情况下稳定蛋白。这些添 加剂包括表面活性剂(参见美国专利5,096,885)、氨基酸(参见美国 专利4,297,344)、多元醇(参见美国专利5,589,167)、天然聚合物(参 见WO 8903671)、合成聚合物(参见Pharm.Res.8：285291，1991)和 金属(参见美国专利6,191,107B1)，这些文献的每一篇均通过引用的 方式纳入本文。

迄今为止，尚没有这样的基于蛋白的治疗剂(即细胞因子和生长 因子)，即所述治疗剂能有效地重现或模拟在健康状态以及疾病或受伤 状态的体内天然出现的生理相关细胞因子和生长因子的复杂组合和生 理水平。现有的每种基于蛋白的治疗剂的给药剂量均比体内正常出现 的细胞因子或生长因子的水平高许多倍。另外，至今无人能以生理水 平给予这些生理相关的细胞因子和生长因子。此外，至今无人能以持 续释放制剂的形式以生理水平给予这些生理相关的细胞因子和生长因 子。因此，申请人在本文中首次提出了本发明，其目标是满足这样的 未被满足的医学需求，即以生理水平提供生理相关的生长因子和细胞 因子(CFS组合物)，在一些情况下，使用一种持续释放的制剂(SR-CFS 组合物)以生理水平递送这些生理相关的生长因子和细胞因子。