[发明专利]纯化或检测靶蛋白的方法无效
申请号: | 200880111453.4 | 申请日: | 2008-08-13 |
公开(公告)号: | CN101821282A | 公开(公告)日: | 2010-09-01 |
发明(设计)人: | L·塞列特;A·施图鲁;F·戴诺;G·佩雷 | 申请(专利权)人: | LFB生物技术公司 |
主分类号: | C07K1/22 | 分类号: | C07K1/22;G01N33/68;C12N15/11 |
代理公司: | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人: | 黄革生;林柏楠 |
地址: | 法国莱*** | 国省代码: | 法国;FR |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 纯化 检测 蛋白 方法 | ||
1.用于纯化或检测存在于溶液中的靶蛋白的方法,所述方法包括:在进行检测或纯化步骤之前,将所述溶液接触通过间隔区固定在固相支持体上的DNA适体的步骤,所述固定化适体与所述靶蛋白特异性结合,但不与所述靶蛋白的任何同源蛋白结合,该同源蛋白也可存在于该溶液中。
2.根据权利要求1的方法,其特征在于:所述靶蛋白与所述同源蛋白具有超过50%、优选超过60%、优选超过70%、优选超过80%、优选超过90%的氨基酸序列同一性。
3.根据权利要求1或2的方法,其特征在于:所述靶蛋白与所述同源蛋白具有糖基化同源性。
4.根据权利要求1~3中任一项的方法,其特征在于:所述靶蛋白为凝血因子,其选自因子VII(FVII)、因子VIII(FVIII)、因子X(FX)、因子IX(因子IX)、因子XI(FXI)、因子XII(FXII)、因子XIII(FXIII)、因子II(凝血酶)、抗凝血酶III(AT III)、肝素辅因子II(HCII)、蛋白C(PC)、凝血调节蛋白(TM)、蛋白S(PS)、因子V(FV)、von Willebrand因子(FvW)和组织因子途径抑制剂(TFPI)。
5.根据权利要求4的方法,其特征在于:所述靶蛋白为人因子VII或兔因子VII。
6.根据权利要求5的方法,其特征在于:所述同源蛋白为兔因子VII或人因子VII。
7.根据权利要求5或6的方法,其特征在于:所述适体包括与SEQ IDNo.1具有至少80%同一性的核苷酸序列。
8.根据权利要求1~7中任一项的方法,其特征在于:所述固相支持体选自芯片、亲和色谱柱、磁性或顺磁性珠和膜。
9.根据权利要求1~8中任一项的方法,其特征在于:所述间隔区选自非特异性寡核苷酸序列或聚乙二醇(PEG)类型的序列。
10.根据权利要求1~9中任一项的方法,其特征在于:所述溶液为体液,尤其是乳、乳源产品、血或血源产品。
11.根据权利要求10的方法,其特征在于:所述溶液为转基因哺乳动物乳或转基因哺乳动物乳来源的产品。
12.用于从包含靶蛋白且可包含与所述靶蛋白同源的蛋白的溶液中特异性纯化靶蛋白的方法,其包括以下步骤:
a)提供固相支持体,其包括通过间隔区固定在所述固相支持体上的DNA适体,特征在于:所述固定化适体与所述靶蛋白特异性结合,但不结合与所述靶蛋白同源的蛋白,
b)将所述固相支持体接触所述溶液,和
c)回收与所述适体结合的靶蛋白。
13.根据权利要求12的方法,其特征在于:所述靶蛋白与所述同源蛋白具有超过50%、优选超过60%、优选超过70%、优选超过80%、优选超过90%的氨基酸序列同一性。
14.根据权利要求12或13的方法,其特征在于:所述靶蛋白为凝血因子,其选自因子VII(FVII)、因子VIII(FVIII)、因子X(FX)、因子IX(因子IX)、因子XI(FXI)、因子XII(FXII)、因子XIII(FXIII)、因子II(凝血酶)、抗凝血酶III(AT III)、肝素辅因子II(HCII)、蛋白C(PC)、凝血调节蛋白(TM)、蛋白S(PS)、因子V(FV)、von Willebrand因子(FvW)和组织因子途径抑制剂(TFPI),优选人或兔因子VII。
15.根据权利要求14的方法,其特征在于:所述适体包括与SEQ IDNo.1具有至少80%同一性的核苷酸序列。
16.根据权利要求12~15中任一项的方法,其特征在于:所述固相支持体选自芯片、亲和色谱柱、磁性或顺磁性珠和膜。
17.根据权利要求12~16中任一项的方法,其特征在于:所述间隔区选自非特异性寡核苷酸序列或聚乙二醇(PEG)类型的序列。
18.根据权利要求12~17中任一项的方法,其特征在于:所述溶液为体液,尤其是乳、乳源产品、血或血源产品。
19.根据权利要求18的方法,其特征在于:所述乳为转基因哺乳动物乳或转基因哺乳动物乳来源的产品。
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