[发明专利]不对称干扰RNA的组合物及其用途

权利要求书

1.一种双链体RNA分子，其包括具有18-23个核苷酸长度的第一链和具有12-17个核苷酸长度的第二链，

其中所述第二链与所述第一链基本上互补，并且与所述第一链形成双链区，

其中所述第一链具有1-9个核苷酸的3′-突出端，和0-8个核苷酸的5′-突出端，

其中所述双链体RNA分子能够在真核细胞中实现选择性基因沉默。

2.权利要求1的双链体RNA分子，其中所述第一链包括与靶mRNA序列至少70％互补的序列。

3.权利要求1的RNA分子，其中所述5′-突出端的至少一个核苷酸选自A、U和dT。

4.权利要求1的RNA分子，其中所述双链区的GC含量是30％-70％。

5.权利要求1的双链体RNA分子，其中所述第一链具有19-23个核苷酸的长度。

6.权利要求1的双链体RNA分子，其中所述第一链具有21个核苷酸的长度。

7.权利要求6的双链体RNA分子，其中所述第二链具有14-16个核苷酸的长度。

8.权利要求6的双链体RNA分子，其中所述第二链具有15个核苷酸的长度。

9.权利要求8的双链体RNA分子，其中所述第一链具有2-4个核苷酸的3′-突出端。

10.权利要求8的双链体RNA分子，其中所述第一链具有3个核苷酸的3′-突出端。

11.权利要求1的双链体RNA分子，其包含至少一个经修饰的核苷酸或其类似物。

12.权利要求11的双链体RNA分子，其中所述至少一个经修饰的核苷酸或其类似物是糖、主链和/或碱基经修饰的核糖核苷酸。

13.权利要求12的双链体RNA分子，其中所述主链经修饰的核糖核苷酸在与另一个核糖核苷酸的磷酸二酯键连接中具有修饰。

14.权利要求13的双链体RNA分子，其中所述磷酸二酯键经修饰而包括氮或硫杂原子中的至少一种。

15.权利要求11的双链体RNA分子，其中所述至少一个经修饰的核苷酸或其类似物是稀有碱基或经修饰的碱基。

16.权利要求11的双链体RNA分子，其中所述至少一个经修饰的核苷酸或其类似物包括肌苷或三苯甲基化碱基。

17.权利要求11的双链体RNA分子，其中所述核苷酸类似物是糖经修饰的核糖核苷酸，其中2′-OH基团由选自H、OR、R、卤素、SH、SR、NH₂、NHR、NR₂或CN的基团替代，其中每个R独立地是C1-C6烷基、链烯基或炔基，并且卤素是F、Cl、Br或I。

18.权利要求11的双链体RNA分子，其中所述核苷酸类似物是包含硫代磷酸酯基团的主链经修饰的核糖核苷酸。

19.权利要求11的双链体RNA分子，其中所述第一链包括至少一个脱氧核苷酸。

20.权利要求19的双链体RNA分子，其中所述至少一个脱氧核苷酸在选自3′-突出端、5′-突出端和双链区的一个或多个区域中。

21.权利要求11的双链体RNA分子，其中所述第二链包括至少一个脱氧核苷酸。

22.权利要求1的RNA分子，其中所述真核细胞是哺乳动物细胞或禽类细胞。

23.一种调节细胞或生物中的基因表达的方法，其包括步骤：

在可以发生选择性基因沉默的条件下，使所述细胞或生物与权利要求1的双链体RNA分子接触，和

介导由所述双链体RNA分子实现的、针对与该双链RNA具有基本上对应的序列部分的靶基因核酸的、选择性基因沉默。

24.权利要求23的方法，其中所述接触步骤包括将所述双链体RNA分子引入可以发生选择性基因沉默的在培养中的或在生物体中的靶细胞内的步骤。

25.权利要求24的方法，其中所述引入步骤选自转染、脂转染、电穿孔、感染、注射、经口施用、吸入、局部和区域施用。