[发明专利]核酸探针及探针聚合物的形成方法

说明书

技术领域

本发明涉及新核酸探针，形成该核酸探针的自我聚合体(聚合物)，能够提高标的分析物检测灵敏度的探针聚合物形成方法，通过该方法生成探针聚合物以及利用该方法检测标的分析物的检测方法。

背景技术

本发明人提出过一种去酶恒温核酸扩增法，即使用多种含有与其他核酸探针互补的碱基序列的核酸探针，通过探针的自我聚合反应(Probe alternation link selfassemblyreaction)形成核酸探针聚合体(聚合物)的方法(以下，将通过探针的自我聚合反应形成聚合物的方法称为PALSAR法)(专利文献1～4)。此外，本发明人也提出利用Palsar法提高目标基因的检测灵敏度的方法(专利文献5)。

通过上述方法，虽然能高灵敏度地检测出目标基因，但需要使用多种核酸探针来形成信号探针聚合物。

专利文献1：日本专利第3267576号公报

专利文献1：日本专利第3310662号公报

专利文献3：国际公开第02/31192号公报

专利文献4：日本专利特开2002-355081号公报

专利文献5：国际公开第03/029441号公报

发明内容

发明要解决的课题

本发明目的在于提供能够简便且有效地形成核酸探针聚合物的方法，由该方法形成的探针聚合物，使用该方法的新核酸探针以及高灵敏度且简便地检测标的分析物的标的分析物检测方法。

解决课题的手段

本发明人为了解决上述课题，经过反复研究，终于发现在核酸探针的一个区域，以此区域的中心位置为界，通过构成对称相对的碱基间具有互补的镜像关系(对称)的碱基序列，并且仅以一种核酸探针形成该核酸探针的聚合物。

即本发明中的核酸探针的特征是，含有3个以上的核酸区域，同时该核酸探针的各个核酸区域含有第1区域以及与该第1区域互补且邻接的第2区域。

本发明的形成探针聚合物的方法，其特征是使本发明中的核酸探针发生反应生成该核酸探针的聚合物。

本发明的探针聚合物的特征是通过上述的本发明中的探针聚合物形成方法形成。

本发明的标的分析物的检测方法，其特征是根据上述本发明中探针聚合物的形成方法形成探针聚合物，通过检测出该探针聚合物来检测标的分析物。

本发明的标的分析物的检测方法中，优选使用能与上述标的分析物特异结合可能且含有与上述核酸探针相同的一部分或者全部碱基序列的辅助探针，形成含有上述标的分析物、上述辅助探针和上述探针聚合物的复合体，通过分析该复合体检测上述标的分析物。同时，本说明书中的辅助探针是指含有能与被检测标的分析物进行特异结合的部分，并且具有与用于形成聚合物的上述核酸探针相同的一部分或者全部碱基序列，起连接标的分析物与探针聚合物的作用。

上述标的分析物可以列举，例如，核酸、抗原、抗体、受体、半抗原、酶、蛋白质、肽、聚合物以及糖类构成的群类中至少一种。

上述标的分析物是核酸的情况时，上述核酸探针通过构成含有与上述标的核酸(目标基因)的一部分互补的序列，能使标的核酸与探针聚合物相结合。

发明效果

根据本发明，能仅通过一种核酸探针形成该核酸探针的聚合物。此外，通过本发明，能简便地检测出标的分析物并且能显著的提高其检测灵敏度。

附图说明

【图1】表示一例本发明的核酸探针的简要说明图

【图2】表示图1记载的核酸探针的结合方式的简要说明图

【图3】表示由图1记载的核酸探针形成的探针聚合物的简要说明图

【图4】显示实施例1的结果的照片

【图5】显示实施例2的结果的照片

【图6】显示实施例3的结果的照片

符号说明

10：本发明的核酸探针，10a、10b、10c：核酸区域，20：氢键，30：探针聚合物。

具体实施方式

以下根据附图对本发明的实施方式进行说明，图示例仅例示，当然可以在不脱离本发明的技术思想的范围内进行各种变形。

图1是表示一例本发明的核酸探针简要说明图。图2是表示图1中的核酸探针的结合方式的简要说明图。图3是表示由图1中的核酸探针形成的自我聚合体(探针聚合物)的简要说明图。