[发明专利]具有长期稳定性的用于热启动PCR的干燥组合物

权利要求书

1.一种用于热启动PCR的干燥组合物，所述干燥组合物包含反应缓冲液、MgCl₂、4种脱氧核苷三磷酸、DNA聚合酶、焦磷酸盐和焦磷酸酶。

2.如权利要求1所述的用于热启动PCR的干燥组合物，其中，所述组合物进一步包含引物组或探针。

3.如权利要求1所述的用于热启动PCR的干燥组合物，其中，所述组合物进一步包含结合至DNA的荧光染料。

4.如权利要求3所述的用于热启动PCR的干燥组合物，其中，所述荧光染料选自于由SyBr Green、EtBr和HRdye所组成的组。

5.如权利要求1所述的用于热启动PCR的干燥组合物，其中，所述组合物进一步包含模板核酸。

6.如权利要求1所述的用于热启动PCR的干燥组合物，其中，所述焦磷酸盐以0.3-5mM的浓度包含于最终反应溶液中，所述焦磷酸酶以高于30mU直至200mU的浓度包含于20μl的最终反应溶液中。

7.如权利要求6所述的用于热启动PCR的干燥组合物，其中，所述焦磷酸盐以0.95-3.0mM的浓度包含于所述最终反应溶液中。

8.如权利要求6所述的用于热启动PCR的干燥组合物，其中，所述焦磷酸酶以50-100mU的浓度包含于20μl的所述最终反应溶液中。

9.如权利要求1所述的用于热启动PCR的干燥组合物，其中，所述DNA聚合酶为选自于由下列物质所组成的组中的一种或多种聚合酶：具有5′→3′外切核酸酶活性的聚合酶、具有3′→5′外切核酸酶活性的聚合酶、以及不具有5′→3′外切核酸酶活性和3′→5′外切核酸酶活性的聚合酶。

10.如权利要求1所述的用于热启动PCR的干燥组合物，其中，所述组合物进一步包含对于核酸不具有反应性的染料。

11.如权利要求10所述的用于热启动PCR的干燥组合物，其中，所述染料为选自于由罗丹明、tamra、lax、溴酚蓝、二甲苯青、溴甲酚红和甲酚红所组成的组中的一种或多种物质。

12.如权利要求1所述的用于热启动PCR的干燥组合物，其中，所述组合物进一步包含选自于由多元醇、明胶、牛血清白蛋白(BSA)、Thesit和PET-8000所组成的组中的一种或多种物质。

13.如权利要求1所述的用于热启动PCR的干燥组合物，其中，所述组合物用于多重PCR、实时PCR或实时定量PCR。

14.一种用于热启动PCR的干燥组合物的制备方法，所述方法包括下述步骤：在反应管中制备反应混合物，所述反应混合物包含反应缓冲液、MgCl₂、4种脱氧核苷三磷酸、DNA聚合酶、焦磷酸盐和焦磷酸酶；以及将所述反应混合物进行干燥。

15.如权利要求14所述的制备方法，其中，所述反应混合物进一步包含一种或多种引物或探针。

16.如权利要求14所述的制备方法，其中，所述反应混合物进一步包含结合至DNA的荧光染料。

17.如权利要求16所述的制备方法，其中，所述荧光染料选自于由SyBr Green、EtBr和HRdye所组成的组。

18.如权利要求14所述的制备方法，其中，所述反应混合物进一步包含模板核酸。

19.如权利要求14所述的制备方法，其中，所述焦磷酸盐以0.3-5mM的浓度包含于最终反应溶液中，所述焦磷酸酶以高于30mU直至200mU的浓度包含于20μl的最终反应溶液中。

20.如权利要求19所述的制备方法，其中，所述焦磷酸盐以0.95-3.0mM的浓度包含于所述最终反应溶液中。

21.如权利要求19所述的制备方法，其中，所述焦磷酸酶以50-100mU的浓度包含于20μl的所述最终反应溶液中。

22.如权利要求14所述的制备方法，其中，所述DNA聚合酶为选自于由下列物质所组成的组中的一种或多种聚合酶：具有5′→3′外切核酸酶活性的聚合酶、具有3′→5′外切核酸酶活性的聚合酶、以及不具有5′→3′外切核酸酶活性和3′→5′外切核酸酶活性的聚合酶。