[发明专利]用于体内基因输送的自组装胶束样纳米颗粒

权利要求书

1.一种纳米颗粒，包含为脂质单层所包裹的核心复合物，所述核心复合物包含与一个或多个阳离子聚合物分子静电结合的一个或多个核酸分子，所述阳离子聚合物与脂质单层内的第一脂质共价缀合。

2.如权利要求1所述的纳米颗粒，其中的阳离子聚合物包含直链或分支聚乙烯亚胺、聚鸟氨酸、聚精氨酸、聚赖氨酸、聚丙烯胺、氨基葡聚糖、或它们的任意组合。

3.如权利要求1所述的纳米颗粒，其中的第一脂质选自由天然的或合成的磷脂、糖脂、氨基脂、鞘脂、长链脂肪酸和甾醇组成的组。

4.如权利要求1所述的纳米颗粒，其中的脂质单层还包含一种或多种非缀合的脂。

5.如权利要求4所述的纳米颗粒，所述一种或多种非缀合磷脂分子选自由天然的或合成的磷脂、糖脂、氨基脂、鞘脂、长链脂肪酸和甾醇组成的组。

6.如权利要求4所述的纳米颗粒，其中，一部分非缀合磷脂分子是PEG化的。

7.如权利要求6所述的纳米颗粒，其中的脂质单层包含PEG-磷脂酰乙醇胺或pNP-PEG-PE。

8.如权利要求1所述的纳米颗粒，其中的脂质单层还包含胆固醇。

9.如权利要求8所述的纳米颗粒，其中脂质单层包含摩尔比率为4∶3∶3的缀合的第一脂质、非缀合的脂和胆固醇。

10.如权利要求8所述的纳米颗粒，还包含PEG-磷脂酰乙醇胺，其中脂质单层包含摩尔比为4∶3∶3∶0.3的缀合的第一脂质、非缀合的脂、胆固醇和磷脂酰乙醇胺。

11.如权利要求1所述的纳米颗粒，所述一个或多个核酸分子包括寡核苷酸、DNA分子、RNA分子或它们的任意组合。

12.如权利要求11所述的纳米颗粒，所述一个或多个核酸分子包括质粒DNA、RNAi、siRNA、反义寡核苷酸或核酶。

13.如权利要求11所述的纳米颗粒，其中的一个或多个核酸分子包括治疗性基因。

14.如权利要求13所述的纳米颗粒，其中的治疗性基因是细胞毒性基因或自杀基因。

15.如权利要求1所述的纳米颗粒，其中的一个或多个核酸分子占所述颗粒重量的最多40％。

16.如权利要求15所述的纳米颗粒，其中的一个或多个核酸分子约占所述颗粒重量的25％。

17.如权利要求1所述的纳米颗粒，其中的阳离子聚合物共价连接到所述第一脂质的烷基链或酰基链的末端

18.如权利要求1所述的纳米颗粒，所述颗粒直径约50nm。

19.包含权利要求1所述颗粒的非病毒载体。

20.如权利要求19所述的载体，还包含靶向剂。

21.如权利要求20所述的载体，其中的靶向剂选自抗体或其抗原结合片段、单链抗体、域抗体、细胞表面受体的配体、和生物素组成的组。

22.如权利要求21所述的载体，其中的靶向剂通过可断裂的键与所述载体相连。

23.如权利要求22所述的载体，其中可断裂的键在低pH下断裂。

24.如权利要求23所述的载体，其中可断裂的键是腙键。

25.如权利要求22所述的载体，其中可断裂的键是连接阳离子聚合物和第一脂质分子的键。

26.制备权利要求1所述纳米颗粒的方法，所述纳米颗粒包含为脂质单层所包裹的核心复合物，该方法包括：

(a)提供核酸、阳离子聚合物-脂质共价缀合物和一种或多种非缀合脂质；

(b)在适合形成核心复合物的条件下使核酸分子与阳离子聚合物-脂缀合物相接触，所述核心复合物包含与缀合物的阳离子聚合物部分静电结合的核酸；和

(c)使核心复合物与非缀合脂质接触以形成脂质单分子层。

27.如权利要求26所述的方法，在步骤(b)中，核酸和阳离子聚合物-脂缀合物在溶液中相接触以形成核心复合物。

28.如权利要求26所述的方法，其中，提供的非缀合脂质呈干燥膜的形式，在步骤(c)前该干燥膜水合。