[发明专利]用于解离Fcgamma-受体-IgG复合物以及纯化与检测IgG的方法和试剂盒

权利要求书

1.一种解离Fcγ-受体-IgG复合物的体外方法，所述方法包括：使该复合物与EndoS多肽接触，由此获得未结合IgG的Fcγ-受体，其中，任选地，所述Fcγ-受体-IgG复合物存在于含有细胞的样品中。

2.根据权利要求1所述的方法，实施所述方法以分离或制备不含与Fcγ-受体相结合的IgG分子的细胞群，所述方法包括：

(a)使含有细胞的样品与EndoS多肽接触；以及

(b)任选地，从所述接触过的样品中分离所述细胞；

由此获得所述细胞群。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述EndoS多肽具有IgG内切糖苷酶活性并包括：

(a)SEQ ID NO：1的氨基酸序列；或

(b)(a)的变体，该变体与SEQ ID NO：1的氨基酸序列具有至少50％同一性；或

(c)上述任一者的片段。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述多肽由SEQ ID NO：1所示的序列组成或基本由SEQ ID NO：1所示的序列组成。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述Fcγ-受体-IgG复合物存在于血液、血清或细胞培养基中。

6.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述Fcγ-受体-IgG复合物存在于单核细胞上和/或细胞群中，所述细胞群基本无IgG亚类IgG₁、IgG₂、IgG₃以及IgG₄中的至少一种、优选两种、三种或所有四种。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法获得的细胞群。

8.一种用于从含有IgG的样品中分离IgG的方法，所述方法包括：

(a)使所述含有IgG的样品与缺乏IgG内切糖苷酶活性的EndoS多肽接触，由此能够形成IgG-EndoS多肽复合物；

(b)从所述接触过的样品中分离所述EndoS；以及

由此获得分离的IgG。

9.一种用于测定样品中是否存在IgG的方法，所述方法包括：

(a)使所述样品与缺乏IgG内切糖苷酶活性的EndoS多肽接触，由此能够形成IgG-EndoS多肽复合物；

(b)任选地，从所述接触过的样品中分离所述EndoS；以及

(c)测定所述分离的EndoS是否与IgG结合，以及

由此测定所述样品中是否存在IgG。

10.根据权利要求8或9所述的方法，其中所述EndoS多肽包括：

(a)SEQ ID NO：2的氨基酸序列；

(b)(a)的变体，该变体与SEQ ID NO：2的氨基酸序列具有至少50％同一性并具有IgG结合活性；或

(c)上述任一者的具有IgG结合活性的片段。

11.根据权利要求8至10中任一项所述的方法，其中所述分离或检测到的IgG为天然的功能活性形式。

12.根据权利要求8至11中任一项所述的方法，其中所述分离或检测到的IgG包括IgG亚类IgG₁、IgG₂、IgG₃以及IgG₄中的至少一种、优选两种、三种或所有四种。

13.根据权利要求8至12中任一项所述的方法，其中步骤(a)还包括使所述样品与能够结合EndoS多肽的磁性纳米颗粒群接触，且步骤(b)包括对所述接触过的样品进行磁场分离。