[发明专利]利用标记物组合钙防卫蛋白和血红蛋白/触珠蛋白复合物从粪便样品评价结肠直肠癌的方法

说明书

本发明涉及帮助评价结肠直肠癌的方法。所述方法特别用于在体外评价结肠直肠癌的存在与否。所述方法例如通过分析生化标记物来实施，包括测量粪便样品中血红蛋白/触珠蛋白复合物以及钙防卫蛋白的浓度，并将所测得的浓度与结肠直肠癌的存在与否相关联。基于本发明的方法，为了进一步改进结肠直肠癌的测定，可以与所述血红蛋白/触珠蛋白复合物以及钙防卫蛋白一起测定粪便样品中的一种或多种其它标记物的水平，并将其与结肠直肠癌的存在与否相关联。本发明还涉及在结肠直肠癌的早期诊断中采用包括血红蛋白/触珠蛋白复合物以及钙防卫蛋白的标记物组，并且教导了用于实施本发明方法的试剂盒。

背景技术

癌症仍然是公共健康的主要挑战，尽管在检测和治疗已经取得了进步。在各种类型的癌症中，结肠直肠癌(＝CRC)是西方人中最为常见的癌症之一。

癌症的分期是所述疾病在范围、阶段、和严重程度方面的分类。其将癌症患者进行分组，使得能够归纳出预后和治疗选择。

当今，TNM系统是最广泛使用的癌症解剖学范围的分类。它代表了一种国际上接受的、统一的分类系统。其中有三个基本的变量：T(原发肿瘤的范围)，N(区域淋巴结的状态)以及M(远处转移的存在与否)。所述TNM标准公布于UICC(International Union Against Cancer)，Sobin，L.H.，Wittekind，Ch.(编辑)，TNM Classification of Malignant Tumours，第五版，1997。

尤其重要的是将CRC早期诊断转化成更好的预后。结肠直肠的恶性肿瘤是由良性肿瘤，即腺瘤引发的。因而，最好的预后能使得患者在腺瘤阶段就被诊断出。早在T_is、N₀、M₀或T1-3、N0、M0期被诊断的患者，如果加以适当治疗，则相比较于当远处转移已经发生才被诊断出的患者的仅10％的5年存活率来说，诊断后存活5年的机会高于90％。

人们在寻找用于评价CRC存在与否的方法，其尤其适用于在癌变前(腺瘤)状态下或者在毫不存在转移(近处或远处都没有)的肿瘤阶段，即在UICC I、II或III类下，灵敏地检测CRC。

癌症被检测/诊断越早；总体存活率越好。这对于CRC是特别符合的。在肿瘤的发展阶段中的预后是不良的。在诊断后五年内超过三分之一的患者将死于进行性疾病，相应于约40％的五年存活率。当前的治疗仅仅治愈一部分患者，对于在疾病的早期阶段诊断的那些患者明显具有最好的效果。

对于作为公众健康难题的CRC，重要的是开发对于结肠直肠癌的更有效的筛选和预防措施。

当前对于结肠直肠癌可用的最早期的检测过程涉及使用便血测试或内窥镜操作。然而，在检测出便血之前一般必须有显著的肿瘤大小。对于根据粪便样品的CRC检测，当前的技术已经很长时间是基于愈创木脂的粪便潜隐血测试。

作为根据粪便的CRC筛选测定，愈创木脂测试是当前最广泛使用的。然而，愈创木脂测试具有不良的灵敏度和不良的特异性。基于愈创木脂的粪便潜隐血测试的灵敏度是～26％，其意味着具有恶性病变的74％的患者将仍未被测出(Ahlquist，D.A.，Gastroenterol.Clin.North Am.26(1997)41-55)。

前癌性和癌性病变的可视化是早期检测的最好方法，但是结肠镜检查是侵入性的，具有显著的费用、风险和并发症(Silvis，S.E.，等人，JAMA235(1976)928-930；Geenen，J.E.，等人，Am.J.Dig.Dis.20(1975)231-235；Anderson，W.F.，等人，J.Natl.Cancer Institute 94(2002)1126-1133)。

在各种疾病的诊断中，大便或粪便样品常规地用于测试寄生虫、脂肪、潜血、病毒、细菌以及其它微生物和化学物质的存在。

粪便采集是非侵入性的，因而理论上理想地用于测试儿科或老年患者、用于远离就诊地点的测试、用于频繁复查以及用于测定很可能存在于消化道中的分析物的存在。

根据本发明的诊断方法是基于来自个体的粪便样品。所述粪便样品经过提取，从这些处理后的粪便中通过特异性组合试剂来分别特定地测量血红蛋白/触珠蛋白复合物和钙防卫蛋白。

然而，由于多种原因，应用免疫测定技术来分析粪便样品被证明有困难。