[发明专利]使用细胞色素P450的金刚烷羟基化物的制备方法

权利要求书

1.N-(5-羟基-2-金刚烷基)-苯甲酰胺衍生物的制备方法，其特征在于，使用细胞色素P450，将N-(2-金刚烷基)-苯甲酰胺衍生物羟基化。

2.如权利要求1所述的制备方法，其中，细胞色素P450为由SEQID NO.1或SEQ ID NO.3记载的氨基酸序列构成的蛋白质，或由在所述氨基酸序列中缺失、置换或附加1个或数个氨基酸而成的氨基酸序列构成，且具有羟基化活性的蛋白质。

3.如权利要求1所述的制备方法，其中，细胞色素P450为由SEQID NO.1记载的氨基酸序列具有选自I77F、L357P、A362T、F41L、I77W、M105I、T234A、F232I、F232L和F232M中的1个或数个突变而成的氨基酸序列构成的蛋白质，或由SEQ ID NO.3记载的氨基酸序列具有选自I77F、I77W、M105I、A196D、F232I、F232L、F232M、T234A、T244A、V399E和K702E中的1个或数个突变而成的氨基酸序列构成的蛋白质。

4.如权利要求1所述的制备方法，其中，N-(2-金刚烷基)-苯甲酰胺衍生物为下式所示的化合物，

[化学式1]

(式中，R为氢或亲水性基团)。

5.如权利要求1所述的制备方法，其中，N-(5-羟基-2-金刚烷基)-苯甲酰胺衍生物为下式所示的化合物，

[化学式2]

(式中，R为氢或亲水性基团)。

6.下式所示化合物的制备方法，

[化学式3]

其特征在于，通过权利要求1～5中任意一项所述的制备方法得到N-(5-羟基-2-金刚烷基)-苯甲酰胺衍生物，并进行脱保护。

7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，不分离N-(5-羟基-2-金刚烷基)-苯甲酰胺衍生物。

8.式(III)所示化合物的制备方法，

[化学式4]

其特征在于，通过权利要求6或7中任意一项所述的制备方法得到(I)所示的化合物，使其与式(II)：A-R¹-R²-R³-X(式中，A为可以被取代的环烃基或可以被取代的杂环基，R¹为单键、-C(＝O)-、-O-或NR⁴-，R²为单键或可以被取代的亚烷基，R³为单键或C(＝O)-，X为羟基、卤素或由羟基衍生的离去基团，R⁴为氢或可以被取代的烷基)所示的化合物反应。

9.使用由SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3记载的氨基酸序列构成的蛋白质，或由在该氨基酸序列中缺失、置换或附加1个或数个氨基酸而成的氨基酸序列构成，且具有羟基化活性的蛋白质，将具有金刚烷骨架的化合物的金刚烷部分羟基化的方法。

10.含有在SEQ ID NO.1记载的氨基酸序列中缺失、置换或附加1个或数个氨基酸而成的氨基酸序列，且具有羟基化活性的蛋白质。

11.由SEQ ID NO.1记载的氨基酸序列具有选自I77F、L357P、A362T、F41L、I77W、M105I、T234A、F232I、F232L和F232M中的1个或数个突变而成的氨基酸序列构成的蛋白质。

12.由在SEQ ID NO.：3记载的氨基酸序列构成的蛋白质，或含有在该氨基酸序列中缺失、置换或附加1个或数个氨基酸而成的氨基酸序列，且具有羟基化活性的蛋白质。

13.由SEQ ID NO.3记载的氨基酸序列具有选自I77F、I77W、M105I、A196D、F232I、F232L、F232M、T234A、T244A、V399E和K702E中的1个或数个突变而成的氨基酸序列构成的蛋白质。

14.下式所示的化合物、其盐或它们的溶剂化物，

[化学式5]

15.下式所示的化合物、其盐或它们的溶剂化物，

[化学式6]

(式中，R为氢或亲水性基团)。