[发明专利]猪肺炎支原体无毒力佐剂化活疫苗

说明书

发明领域

本公开内容一般涉及免疫学和兽医学领域。更具体而言，本公开内容提供了基于猪肺炎支原体(M.hyopneumoniae)J菌株的佐剂化无毒力活猪肺炎支原体组合物，包括免疫原性或疫苗组合物，其帮助减少由猪肺炎支原体的一种或多种强毒力株引起的疾病的严重度和/或预防由猪肺炎支原体的一种或多种强毒力株引起的疾病。还提供了佐剂化无毒力活猪肺炎支原体组合物，包括免疫原性或疫苗组合物，其进一步包括猪环状病毒1型-2型嵌合体经修饰的活疫苗(cPCV1-2)。对动物施用一次或两次剂量的本文公开的佐剂化无毒力活猪肺炎支原体组合物在提供来自猪肺炎支原体强毒力株感染的免疫中是有效的，所述免疫包括细胞介导免疫和/或体液免疫。

发明背景

猪肺炎支原体(也称为M.hyopneumoniae)是猪的支原体肺炎的病原体。该疾病引起久咳、毛发覆盖减少(dull hair coat)、生长阻滞和持续数周的不兴旺外观(unthrifty appearance)。在受感染动物中观察到特别是在腹侧顶叶和心叶中的紫色至灰色实变区域的特征性损害。尽管该疾病引起很少的死亡率，但受累猪通常倾向于通过机会致病菌的继发感染，导致死亡或应激。(R.F.Ross，Mycoplasmaldiseases，第436-444页，in A.D.Laman，等人，(编辑.)Diseasesof Swine，Iowa State University Press，1986)。

该疾病被认为是猪中疾病相关损失的最重要病因之一(Whittlestone，第133-176页，in Tully and Whitcomb(编辑)，The Mycoplasma第2卷：Human and Animal Mycoplasmas，New York，Academic Press，(1979))。该疾病一般导致无效的重量获益者，以及矮小和多病动物。此外，受累猪通常倾向于通过机会致病菌的继发感染(Burch，Pig America第26-27页，1982年12月)。该疾病的经济影响是显著的。已估计单独的经济损失为每年200,000,000至250,000,000美元。

猪肺炎支原体是缺乏细胞壁的生长缓慢的难养菌。它通常难以从呼吸道中分离，这是由于同样定位于呼吸道中的常见第二种因子，猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)。该疾病通过飞沫(aerosol)传播，通过咳嗽并且通过与受累猪或病后带菌猪的直接接触产生。受感染动物和未受感染动物相混合导致早期和频繁再感染。感染通常开始于带菌母猪在产小猪时对小猪的感染。

由于兽群管理技术，感染可能直到生命晚期时才变得明显。当猪集中时，附加感染通常在断奶后观察到。明显疾病通常在6周大或更大的猪中观察到。生长率和饲养转换率在受累动物中明显减少。使用抗生素的现有治疗是昂贵的并且需要长期使用。动物再感染仍是问题。

因此，疫苗目前是用于避免感染及其后果的最有效方法。已存在提供用于保护猪免受猪肺炎支原体感染的疫苗的众多尝试。几个研究者已公开包括重组产生的猪肺炎支原体表面抗原的疫苗，于1990年1月16日颁发的Schaller等人，美国专利号4,894,332；于1988年9月28日公布的欧洲专利公布号283,840。于1986年1月3日公布的PCT公布号WO 86/00019公开了专一地包括猪肺炎支原体质膜的猪肺炎支原体疫苗，其不含其他细胞组分。Etheridge等人，Res.Vet.Sci.33：188(1982)发现当静脉内、皮下或腹膜内给予活疫苗时，针对经由猪肺炎支原体的肺定居的不完全保护。Kristensen等人，Am.J.Vet.Res.42：784(1981)未发现在由热灭活的猪肺炎支原体感染后，猪针对支原体肺炎的保护。Ross等人，Am.J.Vet.Res.45：1899(1984)发现使用通过冻融操作制备的猪肺炎支原体提取物免疫接种猪，仅提供可变的保护，并且在某些情况下，在经免疫接种的猪中注意到增强的损害发展。这些研究者还研究了通过福尔马林灭活制备的全细胞疫苗。福尔马林灭活显著妨碍猪肺炎支原体的保护免疫原性，并且这种疫苗是无效的。Yoshioka等人，美国专利号3,917,819(1975年11月4日颁发)公开了包括由福尔马林灭活的支原体的几种经杀死的支原体疫苗，包括用于猪肺炎支原体的灭活疫苗。Chung-Nan欧洲专利公开571,648公开了基于高度增殖性和抗原性株PRIT-5的猪肺炎支原体疫苗。