[发明专利]提纯分子的装置

说明书

优先权要求

本申请要求2007年10月9日提交的美国临时申请No.60/978,507的权益，该临时申请通过引用而全文包含在本文中。

技术领域

本发明涉及用于在分离步骤之后俘获并收集被分离的生物分子的设备。本发明还涉及使用该设备的方法。

背景技术

分析生物分子，诸如蛋白质、多核酸、脂类和碳水化合物，通常需要一种分离和/或提纯装置。因此，在分离和提纯过程之后，必须收集感兴趣的样本并将其转移到后续分析平台诸如色谱仪。许多方法可以用来进行分离，包括色析分离和电泳分离。不同类型的分离过程背后的原理是使得各种生物分子移动，以不同速率经过分离介质，以便复杂样本中的各种分子在分离过程中从空间上分开。因此，一旦分离过程结束，如何保持空间分辨力就成为一个问题，因为样本离开分离介质并准备转移到下一步骤(例如，另一个分离步骤或分析步骤)。

利用提供高分辨力、再现性和回收率的优选系统进行分离对于蛋白质组分析来说至关重要。在蛋白质学中，基于MS的肽序列策略在分析之前采用熟知的分离技术来降低样本复杂性(Washburn，et al.，2001)。在完整蛋白质水平，二维电泳法继续被广泛采用，但仍然与无可匹敌的分辨力程度相去甚远(Gorg，et al.2004)，但是二维电泳法无法提供分离系统的众多期望特征(Gygi，et al.2000)。

近来由Brunner等描述蛋白质学“定靶”散弹方案的报告示出了完整蛋白质预先分馏来改善分析的重要性(Brunner，et al.，2007)。逐渐受到欢迎的顺选蛋白质分析同样点燃了对有效蛋白质分离策略的需求。虽然如此，除了一些有名的个案之外(Nilsson and Davidsson，2000；Shi，et al.，2004；Wang andHanash，2005；Lubman，et al.，2002)，优化并开发完整水平的蛋白质组分离新方案仍然是未开发的领域。

发明内容

本发明涉及在分离步骤之后俘获并收集生物分子的装置和方法。

在第一方面，本发明提供一种包括分离设备和收集腔的装置。所述收集腔包括：适配成接收所述分离设备端部的进入端口；包括俘获介质的排出端口和位于所述进入端口和排出端口之间的存取端口，其中，通过调节所述分离设备相对于所述存取端口处于所述进入端口的深度来调节所述收集腔的容积。在一种实施方式中，所述分离设备包括电泳分离设备。该实施方式的所述分离设备可以具有长度为10cm以下的分离路径和/或包括含有二聚丙烯酰胺或琼脂的分离介质。在特定实施方式中，所述分离设备包括聚丙烯酰胺凝胶，所述凝胶包括高度为6cm以下且直径大约为0.2-1.0cm的溶解凝胶。

在另一种实施方式中，所述装置的收集腔包含一个或多个可拆卸的俘获器。所述俘获器可以包括疏水俘获器、亲水俘获器、离子交换俘获器、分子量截止俘获器、亲和性俘获器或者它们的组合。在包含一个以上俘获器的实施方式中，所述俘获器可以串联排列。

在另一种实施方式中，所述收集腔内的所述存取端口进一步包括阀。

在另一种实施方式中，所述收集腔内的所述排出端口中的所述俘获介质包括分子量截止值大约为1kDa到大约10kDa的膜。

在额外的实施方式中，所述装置包括两个或更多个收集腔。

所述收集腔可以用单独一块材料构造。此外，所述存取端口之间的间隔可以设计成容纳标准多通道吸移管管理器。所述存取端口可以设计成容纳标准吸移管末端。

在另一种实施方式中，所述装置包括两个以上的分离设备和两个以上的收集腔。所述分离设备的数目可以等于所述收集腔的数目，并且每个收集腔紧接在分离设备的下游设置。所述分离设备和所述收集设备可以并排排列。所述多分离设备和收集腔的结构可以为平面状。所述复用设备还可以配置成弧形、半圆、半椭圆或管形。所述管形结构可以是柱状或椭圆状。各分离设备可以并排排列，或者形成另一种结构，诸如块体，取决于所述复用装置中的单元数目。所述复用装置可以包括8个分离设备和8个收集腔。

在另外的实施方式中，所述装置进一步包括设置在所述分离设备上游的上部腔室和设置在所述收集腔下游的下部腔室。

在第二方面，本发明提供一种利用本发明的装置从一个或多个样本中提纯多种分子或分子分馏物的方法，所述方法包括步骤：(1)提供一个或多个样本；(2)利用所述装置的分离设备分离分子；和(3)经由所述收集腔中的所述存取端口依次收集多种分馏物。