[发明专利]干酪乳杆菌菌株用于制备抑制肥大细胞活化之组合物的用途

说明书

本发明涉及预防和治疗肥大细胞参与的慢性或急性疾病(例如变态反应和某些自身免疫病)的领域。更确切地，本发明涉及益生菌用于抑制肥大细胞活化的用途。

众所周知，肥大细胞是变态反应的主要参与者。变态反应主要依赖于IgE抗体。肥大细胞表达高亲和力IgE受体(FcεRI)，在体内一定比例的所述受体被IgE抗体所占据。当多价变应原与IgE抗体结合使得FcεRI在细胞表面聚集时，FcεRI转导活化信号从而导致肥大细胞活化。活化的肥大细胞释放并分泌多种炎性分子。这些包括储存于肥大细胞颗粒中预先形成的血管活性胺和酶(Miller和Pemberton，2002)，新形成的衍生自脂质的前列腺素、血栓烷和白三烯(Triggiani等，1995)，新转录的细胞因子(Galli等，1991)、生长因子和趋化因子(Kaplan，2001)。这些介质具有广泛的生物学效应。它们增加血管通透性，触发平滑肌收缩，吸引并活化大量炎性细胞。总之，它们在几分钟内同时产生急性反应，接着在数小时内产生后期反应，在数天内产生慢性反应，以及在数月内产生组织重构(tissue remodelling)。

肥大细胞不仅表达IgE受体，还表达IgG受体(FcγR)(Benhamou等，1990；Daeron等，1980)。这些包括活化性受体(小鼠中的FcγRIIIA，人的FcγRIIA)和抑制性受体(人和小鼠中的FcγRIIB)。当通过IgG免疫复合物聚集时，活化性FcγR引发与FcεRI同样的生物学应答(Daeron等，1992；Hazenbos等，1996；Latour等，1992)。当通过免疫复合物与FcεRI或与活化性FcγR共聚集时，FcγRIIB负调控由IgE或IgG抗体诱导的肥大细胞活化(Daeron等，1995a；Daeron等，1995b)。最近发现，在自身免疫性关节炎(Lee等，2002)和脑炎(Robbie-Ryan等，2003)的鼠模型中，肥大细胞在IgG依赖的组织特异性自身免疫性炎症中扮演关键角色。这些病理症状的临床表现在肥大细胞缺陷的小鼠中得以消除。此外，这些疾病的发病严格地依赖于肥大细胞上活化性FcγR与抑制性FcγR之间的比例，并依赖于它们与IgG抗体的结合(Nigrovic等，2007；Robbie-Ryan等，2003)。

除了在炎症中的作用，最近发现肥大细胞与微生物相互作用并有助于针对病原体的保护。它们存在于几乎所有组织中，特别是那些与外部环境交界的部位(皮肤、舌、胃、肠、肺等)。它们表达Toll样受体(Toll-like Receptors，TLR)以及能使它们与细菌和微生物来源之可溶性分子(包括内毒素、CpG核苷酸、肽聚糖和脂肽)相互作用的其它受体。当与其配体结合后，大多数这些受体可转导还导致促炎介质分泌的信号(Arock等，1998)。此外，肥大细胞可吞噬细菌(Arock等，1998)。由盲肠结扎和穿刺引起的小鼠腹膜炎模型清楚地表明肥大细胞在细菌感染中的保护作用：此种攻击导致发生严重的腹膜炎后，大多数野生型小鼠仍存活，而大多数肥大细胞缺陷的小鼠则死亡(Shelley等，2003；Supajatura等，2001)。

基于以上的数据，肥大细胞可作为固有免疫系统的细胞，又因为它们表达FcR，所以它们可借助抗体来参与获得性免疫。因此，它们很好地适用于固有免疫和获得性免疫中，从而使两者相互协作。因此，本发明人研究肥大细胞中固有免疫和获得性免疫之间可能的相互影响。特别地，他们选择研究益生菌是否以及如何干预IgE和IgG诱导的肥大细胞活化。

现已发现某些益生菌菌株对某些炎性疾病(包括某些变态反应)具有有益作用。但是，迄今所有发表的实验均关注导致变态反应或其它炎性疾病的免疫应答之诱导。例如，Kim等人描述，在用卵清蛋白初次致敏2周前，为小鼠口服施用益生菌7周，抑制了该模型中变态反应应答的诱导(Kim等，2005)。

然而，免疫应答(如变态反应应答)可分为两个阶段，即诱导阶段和应答阶段。迄今，尚不知道益生菌菌株对应答阶段(其需要肥大细胞的活化)的作用。

如以下实验部分所举例地，本发明人出人意料地发现，某些益生菌能够抑制肥大细胞活化，从而对某些人类炎性疾病(包括自身免疫病和变态反应)具有保护性作用。重要的是，本发明人得到的结果显示，这些益生菌甚至能阻止已被致敏之对象或已发生自身免疫病之对象中的致病性免疫应答。由于可根据下文描述的发明来治疗已发生炎性疾病的患者，因此这些益生菌开辟了一条治疗新途径。