[发明专利]供纯化用的双亲和性多肽

权利要求书

1.一种用于纯化靶生物分子的方法，包括下列步骤：(a)使靶生物分子、和双亲和性多肽在溶液中接触，以形成具有平衡解离常数K_D,t的靶生物分子与双亲和性多肽的结合，(b)将结合靶生物分子的双亲和性多肽与包含捕捉配体/双亲和性多肽结合位点的固体支持物接触，以形成具有平衡解离常数K_D,s的双亲和多肽与固体支持物的结合，其中在标准条件下所述双亲和性多肽的平衡解离常数之间的比率[K_D,t/K_D,s]至少为10¹，并通过洗脱来回收所述靶生物分子，然而所述双亲和性多肽保持固定在固体支持物上。

2.依照权利要求1的方法，其中所述固体支持物选自包括固相基质和颗粒的组。

3.依照权利要求1的方法，其中所述双亲和性多肽具有范围为10^-2至10^-13M的针对所述靶生物分子的平衡解离常数K_D,t，和范围为10^-9至10^-16M的针对所述捕捉配体的平衡解离常数K_D,s。

4.依照权利要求3的方法，其中所述双亲和性多肽具有范围为10^-4至10^-13M的针对所述靶生物分子的平衡解离常数K_D,t。

5.依照权利要求3的方法，其中所述双亲和性多肽具有范围为10^-6至10^-13M的针对所述靶生物分子的平衡解离常数K_D,t。

6.依照权利要求3的方法，其中所述双亲和性多肽具有范围为10^-11至10^-16M的针对所述捕捉配体的平衡解离常数K_D,s。

7.依照前述任一项权利要求的方法，其中所述双亲和性多肽的平衡解离常数之间的比率[K_D,t/K_D,s]是至少10²。

8.依照权利要求7的方法，其中所述双亲和性多肽的平衡解离常数之间的比率[K_D,t/K_D,s]是至少10³。

9.依照权利要求7方法，其中所述双亲和性多肽的平衡解离常数之间的比率[K_D,t/K_D,s]是至少10⁴。

10.依照权利要求1的方法，其中所述靶生物分子的洗脱是通过改变溶液中的pH、离子强度、或离液离子含量之任一，或其任意组合来实现的。

11.依照权利要求1的方法，其中所述双亲和性多肽是融合多肽。

12.依照权利要求11的方法，其中所述双亲和性多肽的靶生物分子结合部分选自下组：蛋白A、抗体、抗体片段、蛋白A片段、蛋白A衍生的IgG结合域、脂笼蛋白、凝集素。

13.依照权利要求1的方法，其中所述双亲和性多肽的配体结合部分选自下组：抗生物素蛋白、链霉抗生物素蛋白、中性抗生物素蛋白、类固醇受体、抗体、抗体片段、脂笼蛋白、凝集素、淀粉葡糖苷酶、纤维素结合域。

14.依照权利要求12-13中任一项的方法，其中所述抗体选自下组：美洲驼和骆驼抗体。

15.依照权利要求11的方法，其中所述融合多肽是通过蛋白A或蛋白A衍生的IgG结合域的至少一个IgG结合域与抗生物素蛋白、链霉抗生物素蛋白、或中性抗生物素蛋白的至少一个生物素结合域的融合来生成的。

16.依照权利要求1的方法，其中所述捕捉配体选自下组：生物素、阿卡波糖、类固醇、半抗原、表位肽、染料、和酶抑制剂。

17.依照权利要求16的方法，其中附着至所述固体支持物的所述捕捉配体是生物素，而所述靶生物分子是IgG。

18.依照权利要求1的方法，其中所述固体支持物是固相基质。