[发明专利]用于改善植物应激耐性的玉米乙烯信号转导基因及其调节

权利要求书

1.分离的核酸，包括选自以下的成员：

(a)与编码选自SEQ ID NOS：10、8、6或4的多肽的多核苷酸具有至少90％序列同一性的多核苷酸，所述同一性通过BLAST 2.0算法以缺省参数测定；

(b)编码选自SEQ ID NOS：10、8、6或4的多肽的多核苷酸；

(c)使用在严紧杂交条件下与选自SEQ ID NOS：9、7、5和3的多核苷酸内位点选择性杂交的引物，由玉米(Zea mays)核酸文库扩增的多核苷酸；

(d)在严紧杂交条件下并于50℃在2×SSC中洗涤，与选自SEQ IDNOS：9、7、5和3的多核苷酸选择性杂交的多核苷酸；

(e)选自SEQ ID NOS：9、7、5和3的多核苷酸；

(f)与(a)、(b)、(c)，(d)或(e)的多核苷酸互补的多核苷酸；以及

(g)包含(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)的多核苷酸中至少25个连续核苷酸的多核苷酸。

2.重组表达盒，包含在有义或反义方向可操作地连接于启动子的权利要求1所述的成员。

3.宿主细胞，包含权利要求2所述的重组表达盒。

4.转基因植物，包含权利要求2所述的重组表达盒。

5.如权利要求4所述的转基因植物，其中所述植物是单子叶植物。

6.如权利要求4所述的转基因植物，其中所述植物选自玉米、大豆、向日葵、高粱、卡诺拉、小麦、苜蓿、棉花、水稻、大麦和谷子。

7.来自权利要求4所述的转基因植物的转基因种子。

8.调节植物中乙烯反应的方法，包括：

(a)将包含可操作地连接于启动子的多核苷酸的重组构建体引入植物细胞，其中所述多核苷酸与SEQ ID NOS：9、7、5、3或1的多核苷酸或其互补多核苷酸具有至少90％序列同一性，所述同一性通过BLAST 2.0算法以缺省参数测定；

(b)在植物细胞生长条件下培养所述植物细胞；以及

(c)诱导所述多核苷酸表达足以调节所述植物中ERF3、EIN5、EBF2、EBF1或EIN3的水平的时间。

9.如权利要求8所述的方法，其中所述植物是玉米。

10.调节植物中乙烯反应的方法，包括：

(a)将包含可操作地连接于启动子的编码ERF3、EIN5、EBF2、EBF1或EIN3蛋白的多核苷酸的核苷酸构建体引入植物细胞；

(b)在植物细胞生长条件下培养所述植物细胞；以及

(c)由所述植物细胞再生植物；其中所述植物的乙烯敏感性受到调节。

11.如权利要求10所述的方法，其中所述植物选自：玉米、大豆、高粱、卡诺拉、小麦、苜蓿、棉花、水稻、大麦、谷子、花生和可可。

12.如权利要求11所述的方法，其中所述植物细胞来自单子叶植物。

13.如权利要求10所述的方法，其中所述乙烯敏感性下降。

14.如权利要求13所述的方法，其中所述构建体是抑制构建体。

15.如权利要求14所述的方法，其中所述抑制构建体抑制EIN3或EIN5活性。

16.如权利要求13所述的方法，其中所述构建体是超表达构建体。

17.如权利要求16所述的方法，其中所述超表达构建体增加了ERF3、EBF1或EBF2的活性。

18.如权利要求10所述的方法，其中所述构建体包含选自SEQ IDNO：1、3、5、7或9的序列。

19.由权利要求10所述的方法产生的转基因植物。

20.如权利要求19所述的转基因植物，其中与未转化的植物相比，所述植物的乙烯敏感性降低。

21.分离的蛋白，其包含选自以下的成员：

(a)来自选自SEQ ID NOS：10、8、6和4的多肽的至少20个连续氨基酸的多肽；

(b)选自SEQ ID NOS：10、8、6和4的多肽；

(c)与选自SEQ ID NOS：10、8、6和4的多肽具有至少80％序列同一性的多肽，其中所述序列同一性使用BLAST 2.0以缺省参数下测定；以及

(d)由权利要求1的成员编码的至少一种多肽。