[发明专利]抗黄瓜黄脉病毒的甜瓜种植物

说明书

技术领域

本发明涉及抗黄瓜黄脉病毒(CVYV)的甜瓜种植物，和衍生的植物部分。本发明进一步涉及生产所述植物的方法，及通过所述方法获得的抗CVYV的植物，和从所述抗CVYV植物获得的植物部分。

背景技术

CYVY为Potyviridae科番薯属(Ipomovirus)的病毒。它是一个相当不稳定的病毒，有多个杆状的颗粒，一般长为740-800nm、宽为15-18nm。据知该CVYV的病毒核酸包括双链RNA。

该病毒的宿主范围有限，宿主主要限于葫芦科植物。该科包括重要的经济作物如黄瓜，南瓜类(包括南瓜)、甜瓜类和西瓜。一般来讲，尽管CVYV感染是黄瓜产量的一个难题，南瓜、西葫芦、西瓜和甜瓜的产量也会受影响。

CVYV一般是由白粉虱传播，感染CVYV的甜瓜属植物(甜瓜)会出现叶脉变黄、或叶脉透明并阻碍植物的生长从而导致产量下降。CVYV感染也可以导致植物的死亡。

因此，当植物被感染时，CVYV可以对作物造成灾难性的影响。通过例如在无白粉虱的环境下培育种子，或使用如杀虫剂处理这样的方法预防感染一般是费用高和/或对环境不利。此外，这些方法并不能总是提供令人满意的结果。

尽管进行过多次寻找抗CVYV的尝试，但至今尚未有关于抗CVYV的甜瓜种植物的报道。有可抵抗CVYV的其它黄瓜属植物的报道，如C.africanus，C.dipsaceus和C.prophetarum(Nieto et al.BMC Plant Biology(2007)7：34)。本发明的目的是提供抗CVYV的甜瓜种植物。

发明内容

本发明的目的是提供一种甜瓜种植物，该植物中的基因组中含有一个遗传成分，所述遗传成分包含一抗黄瓜黄脉病毒(CVYV)的数量性状基因位点(QTL)，或者其抗CVYV的部分，其至少与一个分子标记基因地连接，在此所述的标记是选自包含E13/M48-259.69-P2(扩增引物SEQ ID Nos：1和2，迁移率259-260bp)，E16/M48-377.36-P2(扩增引物SEQ ID Nos：3和4，迁移率377-378bp)，E13/M48-261.30-P2(扩增引物SEQ ID Nos：5和6，迁移率261-262bp)和E26/M62-076.8-P2(扩增引物SEQ ID NOs：7和8，迁移率76-77bp)的组中，并且，其所述的植物对CVYV有抗性。

根据本发明，术语“抗CVYV的”和“CVYV抗性”是指与非抗性植物例如在相似的环境条件和病虫的压力下易感染的植物相比，植物在正常病原体的压力下，限制病毒生长和发育的能力。

抗性和易感染植物的区别能够通过例如机械接种的方法确定。为此，一种CVYV接种混合物，是在磷酸缓冲液(KH2PO4pH＝7.0)中研磨10g感染CVYV的新鲜甜瓜(C.sativus L.)叶子制得。接着，向混合物中添加活性炭和碳化硅粉末。在接种前，使甜瓜幼苗沾上碳化硅。

在此术语“QTL”用于领域识别方法中。术语“抗CVYV的QTL”指的是定位于甜瓜的一个特定染色的区域，该区域与至少一个编码为抗CVYV的基因或至少一个调节区如一个可控制涉及CVYV抗性的的一个或多个基因表达的染色体区连接。

QTL可以例如为包含其产物具有遗传抗性的一个或多个基因。可选择地，QTL可以例如为包含调节基因或序列，其产物能影响植物的基因组上其他基因位点上的基因表达，从而具有CVYV抗性。

根据本发明的内容，术语“分子标记”指的是一种指示剂，用于使各核苷酸序列本质的区别可见的方法中。这些指示剂的例子有：限制性片段长度多态性(RFLP)标记、扩增片段长度多态性(AFLP)标记、单核苷酸多态性(SNPs)、插入突变、小随体标记、特异序列扩增区域(SCARs)、切割的扩增产物多态性序列(CAPS)标记、或同工酶标记、或本发明所定义的一种特定基因和染色体定位的标记联合体。

在此所说的“连接QTL的分子标记”是指SNPs、插入突变及更多惯用的AFLP标记或用于本领域的任何类型标记。